结缔组织生长因子反义寡核苷酸对胰腺癌细胞基质金属蛋白酶-9、血管内皮生长因子表达及细胞增殖与侵袭的影响

作     者：于鸿 叶军 焦霞 肖蔚 黄俊星 王朝夫 施达仁 YU Hong;YE Jun;JIAO Xia;XIAO Wei;HUANG Jun-xing;WANG Chao-fu;SHI Da-ren

作者机构：泰州市人民医院病理科江苏省225300 泰州市人民医院肿瘤科江苏省225300 泰州市人民医院医学研究中心江苏省225300 复旦大学附属肿瘤医院病理科 

出 版 物：《中华临床医师杂志（电子版）》 (Chinese Journal of Clinicians(Electronic Edition))

年 卷 期：2012年第6卷第16期

页      面：4615-4620页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：江苏省"333工程"培养资金资助项目(200924) 南通大学自然科学基金(10Z088) 

主　　题：寡核苷酸类,反义 基质金属蛋白酶9 血管内皮生长因子类 结缔组织生长因子 

摘      要：目的通过研究结缔组织生长因子(CTGF)反义寡核苷酸(ASODN)对人胰腺癌细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)表达及细胞增殖与侵袭力的影响,深入探讨CTGF在胰腺癌发生、发展中的作用机制,为CTGFASODN在胰腺癌基因治疗中的运用奠定理论基础。方法经脂质体介导将CTGFASODN转染人胰腺癌细胞株SW1990,荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Westernblot检测转染细胞CTGF、MMP-9与VEGFmRNA与蛋白表达;噻唑盐(MTT)比色法检测转染细胞的增殖活性;采用Transwell小室检测细胞侵袭能力。结果 (1)荧光显微镜及流式细胞仪检测显示CTGFASODN可成功转染SW1990细胞。(2)反义组、无义组和单加脂质体组细胞CTGFmRNA表达量分别为0.24±0.09、0.67±0.21、0.63±0.18,反义组较其他组的mRNA表达明显减少(P0.01);相应的CTGF蛋白表达量分别为0.19±0.07、0.75±0.26、0.71±0.23;相应的MMP-9mRNA表达量分别为0.21±0.12、0.78±0.35、0.81±0.37;相应的VEGFmRNA表达量分别为0.16±0.06、0.42±0.22、0.43±0.28;相应的MMP-9蛋白表达量分别为0.68±0.22、1.97±0.46、1.92±0.39;相应的VEGF蛋白表达量分别为0.27±0.07、0.52±0.19、0.55±0.18,反义组CTGF、MMP-9和VEGF的表达较其他组显著降低(P0.01)。(3)反义组、无义组、单加脂质体组细胞增殖活性分别为1.67±0.14、2.34±0.17、2.29±0.21,反义组较其他组细胞增殖被显著抑制(P0.01)。(4)反义组、无义组、单加脂质体组微孔滤膜外侧细胞数分别为24.88±6.17、52.37±8.62、55.49±8.83,反义组较其他组微孔滤膜外侧细胞数显著减少(P0.01)。结论 CTGFASODN转染可有效抑制SW1990细胞CTGF的表达,并降低其MMP-9、VEGF的表达及细胞增殖活性与细胞侵袭力。