SYBR green Ⅰ实时荧光PCR法检测KIR基因型

作     者：许联红 王永仿 戚传平 蒋立新 XU Lian-hong;WANG Yong-fang;QI Chuan-ping;JIANG Li-xin

作者机构：江苏大学附属武进人民医院检验科江苏常州213002 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2011年第27卷第12期

页      面：1295-1297,1300页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：武进科技计划项目(WS2010012) 

主　　题：杀伤细胞免疫球蛋白样受体 基因分型 实时聚合酶链反应 熔解曲线 

摘      要：目的:建立一种新的杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因分型方法。方法:利用16对KIR序列特异性引物和两对内参照引物及荧光染料SYBR Green I进行实时聚合酶链反应(real-time PCR),分析各扩增产物的熔解曲线,确定各个KIR基因熔解温度和特征,并以此为依据判断16种KIR基因的出现或缺失。对样本DNA进行不同倍数稀释检测该方法的敏感性。结果:分析熔解曲线能有效地进行KIR基因分型。该方法甚至可以对0.1 ng DNA的样本成功进行KIR分型。利用该方法成功地对10例外周血基因组DNA和10例宫颈细胞基因组DNA进行了KIR分型。结论:SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR应用于KIR基因分型,具有简单、快速、敏感、实时和环保的特点,为实现KIR分型的自动化提供可能性。