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毛细管电泳法检测癌基因C-myc胃癌中基因点突变

Determination of Mutation of C-myc Oncogene in Gastric Cancer by Capillary Electrophoresis

作     者:谢希晖 王荣 贾正平 谢华 张爱梅 徐娟 王晓莉 王先华 XIE Xi-Hui;WANG Rong;JIA Zheng-Ping;XIE Hua;ZHAMG Ai-Mei;XU Juan;WANG Xiao-Li;WANG Xian-Hua

作者机构:兰州军区兰州总医院临床药理基地 兰州大学药学院 西北师范大学生命科学院 

出 版 物:《分析化学》 (Chinese Journal of Analytical Chemistry)

年 卷 期:2011年第39卷第11期

页      面:1695-1700页

核心收录:

学科分类:1002[医学-临床医学] 07[理学] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基  金:国家自然基金(No.20775089) 甘肃省自然基金(No.ZS031-A25-70-E) 中国博士后基金(No.2005037576)资助项目 

主  题:胃癌 C-myc 突变 毛细管电泳 单链构象多态性 限制性片段长度多态性 

摘      要:癌基因C-myc激活和突变在胃癌形成过程中起着重要作用。通过毛细管电泳(CE)方法检测50例胃癌患者中C-myc基因突变,建立一种准确、快速诊断早期胃癌的方法。本实验采用PCR扩增胃癌及癌旁正常组织中C-myc基因第二外显子易发突变的部位基因序列,扩增样品分别经96℃变性和EcoRⅤ酶切处理,以PAGE-SSCP,CE-SSCP,CE-RFLP分别对其突变情况进行检测。优化的CE检测条件:筛分介质PEO浓度3.0%,pH 8.2,电压15 kV,温度15℃;荧光检测:λex=488 nm,λem=520 nm。检测结果:C-myc基因总突变率为20.0%(10/50)。测序分析结果显示C-myc基因第二外显子第53密码子存在点突变,碱基A变为碱基T(GAT→GTT),碱基的改变使氨基酸由亮氨酸替代为谷氨酰胺。本研究数据证实C-myc基因突变与胃癌的形成紧密相关,CE检测C-myc突变基因可作为胃癌早期诊断的简便可靠的方法。

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