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拮抗链霉菌R_(2)A-15发酵条件优化及其活性稳定性分析

Optimization of Fermentation Conditions and Analysis of Activity Stability of Antagonist Streptomyces sp.R_(2)A-15

作     者:梁嘉振 郭家勇 杨铮蕴 罗婉 罗东程 杨春敏 李羽 谢雨轩 LIANG Jiazhen;GUO Jiayong;YANG Zhengyun;LUO Wan;LUO Dongcheng;YANG Chunmin;LI Yu;XIE Yuxuan

作者机构:广州工商学院广东佛山528135 

出 版 物:《热带作物学报》 (Chinese Journal of Tropical Crops)

年 卷 期:2024年第45卷第8期

页      面:1685-1695页

学科分类:09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 090402[农学-农业昆虫与害虫防治] 

基  金:广州工商学院2021年度国家级大学生创新创业训练计划项目(No.202113714005) 广州工商学院2023年度国家级大学生创新创业训练计划项目(No.202313714005) 广州工商学院2022年度校级科研项目(No.KYYB202225) 

主  题:指状青霉 链霉菌R_(2)A-15 抑菌活性 发酵优化 稳定性 

摘      要:柑橘是我国最重要的水果之一,其采后发生的柑橘绿霉病严重威胁柑橘的质量安全,而且还会引起果品中真菌毒素的污染。本团队从广东省湛江市廉江九洲江红橙园的红橙植株根部土壤中,分离筛选出一株对柑橘绿霉病病原菌具有良好拮抗作用的链霉菌R_(2)A-15,对其进行发酵条件优化和抑菌活性稳定性分析,为柑橘绿霉病生防菌剂的制备与应用提供参考。本研究以指状青霉(Penicillium digitatum)为靶标菌,根据纸片扩散法的抑菌圈直径大小判断发酵液抑菌活性。采用单因素和交叉组合试验优化菌株R_(2)A-15发酵培养基,通过响应面分析法对发酵条件进行优化,提高发酵液抑菌活性,并对发酵液进行不同的酸碱、温度和紫外线条件的稳定性研究。在单因素试验和交叉组合试验中,菌株发酵培养基的最适碳源为玉米面,最适氮源为酸水解酪蛋白。根据响应面分析法,得出玉米面和发酵时间对发酵液抑菌活性有显著影响。经验证试验得出,最大的发酵液抑菌活性的最优发酵培养基为:玉米面12.09 g,酸水解酪蛋白4.00 g,碳酸钙2.00 g,硫酸镁2.00 g,磷酸氢二钾2.00 g,氯化钠1.00 g,蒸馏水1 L;最优发酵条件为:发酵初始pH7.0、发酵时间37.50 h、发酵温度34℃、接种量3%、摇瓶装液量100 mL/250 mL。菌株发酵液抑菌活性优化后比优化前提高了39%。菌株发酵液经过不同的温度和紫外线条件处理后,整体抑菌活性能维持在一个相对稳定的高活性水平上,但在强酸强碱条件下,发酵液抑菌活性有所下降。结果表明,链霉菌R_(2)A-15对柑橘绿霉病病原菌具有较好的稳定抑菌效果,有较好的实际应用前景,为后期规模化发酵以及菌剂的开发奠定基础。

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