靶向碱性成纤维生长因子的小分子干扰RNA诱导胶质瘤U251细胞凋亡机制的初步探讨

作     者：吴静超 冯学泉 王金环 刘俊 张飚 徐新女 刘宏胜 WU Jing-chao*;FENG Xue-quan;WANG Jin-huan;LIU Jun;ZHANG Biao;XU Xin-nü;LIU Hong-sheng

作者机构：天津医科大学一中心临床学院300192 天津市第一中心医院神经外科 天津市环湖医院神经外科 天津市环湖医院临床检验科 天津市环湖医院卫生部危重病急救医学重点实验室 

出 版 物：《中华外科杂志》 (Chinese Journal of Surgery)

年 卷 期：2012年第50卷第10期

页      面：928-932页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：基金项目:国家青年自然科学基金资助项目(81101911) 

主　　题：成纤维细胞生长因子2 RNA,小分子干扰 神经胶质瘤 细胞系,肿瘤 细胞 凋亡 

摘      要：目的初步探讨靶向碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的小分子干扰RNA（siRNA）诱导胶质瘤U251细胞凋亡的作用机制。方法将U251细胞分为对照组、空载组和实验组，空载组和实验组按感染复数（MOI）=100分别进行空载体腺病毒（Ad—null）和含有bFGF小分子干扰RNA的重组腺病毒（Ad-bFGF-siRNA）转染，转染72h后通过Western blot方法检测相关蛋白的表达，并应用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化，多组间均数比较采用单因素方差分析（One—way ANOVA）。结果实验组细胞经转染Ad—bFGF—siRNA72h后，Western blot结果显示，与对照组和空载组相比bFGF蛋白表达明显降低，同时Cytochrome C、Caspase-3及Bax凋亡相关蛋白的表达增强，Bcl—xl和Bcl-2蛋白的表达降低；经流式细胞仪检测，线粒体膜电位高的细胞所占的比例实验组为74．4％±4．7％与对照组的92．1％±2．5％、空载组的90．9％±1．8％相比明显下降，差异有统计学意义（F=28．805，P〈0．05）；激光共聚焦显微镜的结果显示实验组的红色荧光与绿色荧光的比值为0．83±0．12与对照组的1．36±0．40和空载组的1．32±0．35相比明显下降，差异具有统计学意义（F=7．920，P〈0．05）。结论靶向bFGF的siRNA可能通过线粒体途径诱导胶质瘤U251细胞非淋菌性尿道凋亡。