胸膜肺炎放线杆菌自转运粘附素Apa1/Apa2基因敲除菌株的构建及其生物学特性研究

作     者：翟瑞东 王磊 计群 杨舒心 秦万海 韩文瑜 雷连成 ZHAI Rui-dong;WANG Lei;JI Qun;YANG Shu-xin;QIN Wan-hai;HAN Wen-yu;LEI Lian-cheng

作者机构：吉林大学动物医学学院吉林长春130062 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2014年第36卷第2期

页      面：134-139页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金(31072133) 

主　　题：胸膜肺炎放线杆菌 三聚体自转运粘附素 △Apa1 △Apa2菌株 构建与生物学特性 

摘      要：为研究三聚体自转运粘附素(TAAs)对胸膜肺炎放线杆菌(APP)生物学特性的影响,本研究利用自杀性载体系统,通过正负向筛选标记的同源重组方法筛选APP血清5b型L20菌株的TAAs基因Apa1及Apa2的双基因敲除菌株,命名为△Apa1/△Apa2菌株,以野生菌株为对照,比较△Apa1/△Apa2菌株在体外的生物学特性变化,以小鼠为动物模型检测TAAs基因缺失对细菌毒力的影响。体外试验表明,△Apa1/△Apa2菌株在BHI液体培养基中生长速率与野生菌株无明显差异;电镜下观察△Apa1/△Apa2菌株菌体表面粗糙,有絮状物沉积;自凝、被膜形成能力下降;对RAW264.7细胞的粘附效率低于野生菌株。小鼠体内试验表明TAAs基因的缺失导致细菌毒力降低,在肺部和脾脏的定殖菌量明显低于野生菌株,然而两者的病理学差异不显著。本研究表明TAAs影响APP的形态、自凝、被膜形成等特性,并在APP粘附细胞以及对小鼠致病性方面发挥重要作用,为进一步研究TAAs在APP感染机制中的作用奠定了基础。