补体C5a受体拮抗剂体外筛选平台的建立

作     者：王会会 陈国江 杨跃梅 魏化伟 王立燕 彭晖 李新颖 王一 黎燕 石艳春 WANG Hui-hui;CHEN Guo-jiang;YANG Yue-mei;WEI Hua-wei;WANG Li-yan;PENG Hui;LI Xin-yin;Wang Li;Li Yan;SHI Yan-chun

作者机构：内蒙古医学院分子生物学中心呼和浩特010059 军事医学科学院基础医学研究所分子免疫学研究室北京100850 

出 版 物：《国际药学研究杂志》 (Journal of International Pharmaceutical Research)

年 卷 期：2011年第38卷第1期

页      面：62-67页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100701[医学-药物化学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30801029) 国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(2007CB512406) 内蒙古科技计划项目(20080502) 内蒙古自然科学基金项目(2009MS1102) 

主　　题：C5a CD88 C5a受体拮抗剂 筛选平台 PMX-53 

摘      要：目的建立稳定的补体C5a受体(C5aR)拮抗剂筛选平台。方法采集人外周静脉抗凝血,与不同浓度C5a、脂多糖及PMX-53孵育10～30 min。通过流式细胞术检测中性粒细胞表面CD11b的表达,溶菌酶检测试剂盒观察中性粒细胞分泌溶菌酶的能力变化,罗丹明-123检测中性粒细胞呼吸爆发的变化,ELISA检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-8的表达变化,Western Blotting检测胞外信号调节激酶(ERK)、蛋白激酶B(AKB或AKT)含量及其磷酸化水平的变化,考察补体C5a刺激及使用阳性药物PMX-53后对各生化指标的影响。结果 C5a刺激人外周血可增强中性粒细胞CD11b的表达,促进溶菌酶释放和IL-8的分泌,激发呼吸爆发,上调ERK、AKT的含量和磷酸化水平,阳性药物PMX-53则能显著抑制C5a的上述生物学效应。结论成功建立C5aR拮抗剂人全血体外筛选平台,为C5aR拮抗剂筛选及功能研究奠定了基础。