犬瘟热病毒截短P蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

作     者：袁维峰 贾红 于萍萍 侯绍华 郭晓宇 史利军 赵占中 朱鸿飞 

作者机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 山东农业大学动物科技学院山东泰安271017 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2013年第40卷第4期

页      面：22-25页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2011js-3 2010js-1 2010js-2) 2012年农业部动物疫情监测与防治项目 

主　　题：犬瘟热病毒 重组P蛋白 单克隆抗体 鉴定 

摘      要：为制备针对犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)P1蛋白的单克隆抗体(McAb),本研究利用重组犬瘟热病毒P1蛋白免疫BALB/c小鼠,并将其脾淋巴细胞与SP2/0进行融合,用CDV包被ELISA板,通过间接ELISA法筛选出两株稳定分泌抗CDV-P1的杂交瘤细胞株(E9E4C10、E9F8D9)。间接ELISA检测腹水效价均为1∶106,亚类鉴定结果均为IgG2b。Western blotting和间接免疫荧光(IFA)分析结果表明,两株单克隆抗体均能与重组P1蛋白和CDV发生反应;ELISA叠加试验增殖结果表明,两株单克隆抗体识别的抗原表位不同。本研究制备的特异性抗CDV-P1的单克隆抗体为建立CDV免疫学检测方法和P蛋白的功能研究奠定了基础。