一种快速检测水稻外源基因的方法

作     者：张启军 吕川根 宗寿余 孙永华 夏士健 漆庆明 Zhang Qijun;Lv Chuangen;Zong Shouyu;Sun Yonghua;Xia Shijian;Qi Qingming

作者机构：国家水稻改良中心南京分中心江苏省优质水稻工程技术研究中心南京210014 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2007年第5卷第5期

页      面：729-734页

学科分类：09[农学] 0901[农学-作物学] 

基　　金：江苏省农业科学院院基金资助(编号:6110610) 

主　　题：水稻 DNA快速提取 外源基因 快速检测 

摘      要：进行作物分子标记辅助育种选择时需要同时进行大量群体和多个外源基因的分子检测,而现有的方法还不能完全满足分子育种计划的快速实施,需要开拓更高效的基因分子诊断方法。针对这种情况,本研究主要在DNA的简易提取和外源基因的快速检测两个方面进行了探索,结果建立了一种快速检测水稻外源基因的简易方法。该方法的基本操作过程为:首先将单粒稻米放入96孔PCR板里,采用排枪加入BufferⅠ溶液30～50μL,放在沸水中约30s,然后分别加入BufferⅡ和BufferⅢ溶液各30～50μL,再在沸水中煮2min;简单离心后取管中溶液1～2μL做模板进行25个PCR循环后,在反应管中加入4μg的EtBr溶液直接在紫外灯下曝光1s时间即可。