青霉胺联合肝豆汤调控Caspase11-GSDMD通路抑制Wilson病模型神经元焦亡

作     者：韩鑫 张亮亮 董健健 文佩华 徐乐文 徐陈陈 程楠 韩咏竹 

作者机构：安徽中医药大学神经病学研究所 安徽中医药大学神经病学研究所附属医院神经内科 

出 版 物：《中国中西医结合杂志》 (Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Medicine)

年 卷 期：2024年第8期

页      面：974-982页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：安徽省自然科学基金青年项目(No.2208085QH263) 安徽省自然科学基金项目(No.2208085MH226) 安徽省高等学校科学研究项目(No.2023AH050778) 

主　　题：Wilson病 神经元焦亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶11-GSDMD通路 肝豆汤 青霉胺 中西医结合 

摘      要：目的 探讨青霉胺联合肝豆汤对Wilson病（WD）模型神经元焦亡的抑制作用及其潜在机制。方法 体外实验分为正常组、模型组（CuCl2 10μmol/L）、对照组（WEL 20μmol/L）、蟛蜞菊内酯组（CuCl2 10μmol/L+WEL 20μmol/L）；体内实验分为正常组[0.9%NaCl溶液0.2 mL/（10 g·d）]、模型组[0.9%NaCl溶液0.2 mL/（10 g·d）]、肝豆汤组[肝豆汤0.2 mL/（10 g·d）]、青霉胺组[青霉胺0.1 g/（kg·d）]、联合用药组[青霉胺0.1 g/（kg·d）+肝豆汤0.2 mL/（10 g·d）]，给药4周后，通过行为学实验观察小鼠运动功能。取纹状体组织，Fluoro-Jade B(FJB)染色观察神经元损伤、透射电镜（TEM）观察超微结构，电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）检测铜含量，免疫荧光染色观察小胶质细胞活化情况。RT-qPCR和Western Blot法检测各组细胞和小鼠纹状体组织焦亡相关基因和蛋白的表达水平。结果 体内实验中，与正常组比较，模型组运动功能减退，纹状体FJB阳性细胞增多（P0.01），神经元胞体胀大，细胞膜上形成膜孔，小胶质细胞活化程度升高（P0.01），焦亡相关基因和蛋白的表达水平升高（P0.05）。与模型组和青霉胺组比较，联合用药组运动功能改善，FJB阳性细胞减少（P0.01），神经元细胞膜完整，小胶质细胞活化程度降低（P0.01），焦亡相关基因和蛋白的表达水平降低（P0.05）。体外实验中，与正常组比较，模型组焦亡相关基因和蛋白的表达水平升高（P0.05）。与模型组比较，蟛蜞菊内酯组焦亡相关基因和蛋白的表达水平降低（P0.05）。结论 青霉胺联合肝豆汤可有效减少WD模型神经细胞损伤，其机制与抑制Caspase11-GSDMD通路介导的神经元焦亡有关。