重组人促红细胞生成素促进体外培养的人骨髓间充质干细胞增殖

作     者：曾琴兵 程范军 陈龙 唐俊明 刘歧焕 张卫国 高清平 王家宁 CHENG Fan－jun;CHEN Long

作者机构：郧阳医学院附属东风医院血液科湖北十堰442000 郧阳医学院临床医学研究所 郧阳医学院附属东风医院骨科湖北十堰442010 武汉大学人民医院血液科 

出 版 物：《中华器官移植杂志》 (Chinese Journal of Organ Transplantation)

年 卷 期：2009年第30卷第1期

页      面：21-25页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：湖北省自然科学基金(2005ABA081) 湖北省教育厅重点项目(D200724004) 湖北省科技攻关项目(2007AA301C141) 湖北省卫生厅科研基金(QJX200518) 

主　　题：红细胞生成素 重组 骨髓 间质干细胞 细胞增殖 

摘      要：目的观察重组人促红细胞生成素（rhEPO）对人骨髓间充质干细胞（MSCs）增殖的影响，并探讨其可能机制。方法抽取健康志愿者的骨髓液，采用贴壁培养法获取第3代MSCs（P3-MSCs），通过细胞形态特征观察、细胞免疫表型检测以及诱导分化的方法鉴定MSCs。取经过鉴定的P3-MSCs，分别与不同浓度（0．5、1、5、10、50IU／ml）rhEPO共培养，应用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖；以过量特异性抗体封闭EPO受体（EPOR），再用MTT法观察P3-MSCs增殖情况；采用免疫荧光细胞化学染色法检测P3-MSCs的EPOR表达，用Western印迹检测增殖信号通路蛋白表达。结果贴壁培养获取的P3-MSCs同时高表达CD105和CD90，低表达CD34和CD45，并可被诱导分化为脂肪、成骨及软骨细胞。MTT结果显示，给予EPO后，MSCs的增殖明显增强，以浓度为10IU／ml者的作用最为显著；同时加入抗EPOR抗体封闭EPOR后，MsCs的增殖率明显降低（P〈0．01）。P3-MSCs的EPOR表达阳性；用10IU／ml EPO刺激4d后，EPOR、磷酸化蛋白酪氨酸激酶2（pJAK2）及磷酸化信号转导和转录因子-5（pSTAT-5）的表达均明显上调。结论EPO能促进体外培养的骨髓MSCs增殖，该效应经EPOR介导，并与JAK2-STAT5信号途径有关。