以鸡恒定链(Ii)为载体的新城疫病毒-F蛋白表位基因疫苗的免疫原性
Immunogenicity of NDV-F Epitope Gene Vaccine Based on Chicken Invatiant Chain (Ii) as Carrier作者机构:安徽农业大学安徽省人兽共患病学重点实验室 黄山学院
出 版 物:《农业生物技术学报》 (Journal of Agricultural Biotechnology)
年 卷 期:2010年第18卷第6期
页 面:1215-1220页
核心收录:
学科分类:090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
主 题:新城疫病毒(NDV) 鸡恒定链(Ii) 基因疫苗 体液免疫
摘 要:本文研究了以鸡恒定链基因(invariant chain,Ii)为载体的新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)F基因片段的基因疫苗及其小鼠的免疫应答。首先,用重叠延伸法经3轮PCR获得以NDV-F343表位基因(327-359AA)取代鸡恒定链中Ⅱ类分子相关肽段(class-Ⅱassociated invariant chain peptide,CLIP)片段序列,构建了基于恒定链的NDV内源性靶向基因疫苗(C1-△CLIP-Ii-F343)。其次,在观察C1-△CLIP-Ii-F343和无恒定链载体的C1-F343转染真核细胞中,发现它们均能在COS-7细胞中高效表达。最后,将25只68周龄的雌性Balb/c小鼠(Mus musculus)随机分为5组,用C1-△CLIP-Ii-F343和非靶向性疫苗(C1-F343)进行免疫,以C1-△CLIP-Ii、pEGFP-C1和生理盐水作为对照。经3次免疫后,取小鼠尾部血对小鼠的体液免疫进行检测。结果表明,在C1-△CLIP-Ii-F343和C1-F343免疫组小鼠血清中均可检测到针对NDV的特异性抗体,其滴度分别达到1/6400和1/1600。进一步Westernblot研究结果表明,抗体与接种NDV的鸡胚尿囊液和原核表达的PET-NDV-F306蛋白均产生特异性结合。研究结果提示,鸡恒定链作为载体的NDV基因疫苗能够刺激小鼠产生特异性的体液免疫应答,为新城疫疫苗开发提供了一个新的思路。