用mRNA差异显示法寻找人绒毛膜上皮癌与孕早期绒毛组织间的差异基因
mRNA DIFFERENTIAL DISPLAY POLYMERASE CHAIN REACTION WAS USED TO IDENTIFY DIFFERENTIAL GENES BETWEEN CHORIOCARCINOMA AND THE FIRST TRIMESTER VILLI TISSUE IN HUMAN作者机构：山东医科大学组织学胚胎学教研室济南250012 南通医学院神经科学研究所南通226001 山东省高级人民法院技术室济南250014
出 版 物：《解剖学报》 (Acta Anatomica Sinica)
年 卷 期：2000年第31卷第4期
页 面：364-367,I016页
核心收录：
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
摘 要：目的 寻找人绒毛膜上皮癌 (JAR)与孕早期绒毛组织间的差异基因。 方法 采用 m RNA差异显示法 (m RNA differential display PCR,DD- PCR) ,即分别提取正常孕早期绒毛及绒毛膜上皮癌的总 RNA ,在oligod T1 5 作用下分别合成相应的 c DNA ,并以其为模板利用试剂盒中的 2 0对引物组合和α- 32 Pd ATP,Taq酶等进行PCR,将两者的 PCR产物在 6 %变性聚丙烯酰胺凝胶 (PAG)上电泳 ,放射自显影后寻找两者间的差异片段 ,回收差异片段进行二次 PCR,对二次 PCR产物先采用反杂交法初步筛选后再用 Northern Blot鉴定。 结果 从 PAG上切下 32条差异条带 ,经反杂交初步筛选出 11个阳性片段 ,对 11个阳性片段分别做 Northern Blot鉴定 ,其中 1个片段(T2 6 )的基因长度约 1.2 kb,其在绒毛膜上皮癌中的表达远高于正常绒毛组织。 结论 T2
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