基于种特异性COI引物(SS-COI)的桉树枝瘿姬小蜂A、B隐种快速鉴定技术

作     者：王瀚棠 彭欣 杨振德 WANG Han-Tang;PENG Xin;YANG Zhen-De

作者机构：广西大学林学院广西森林生态与保育重点实验室南宁530004 广西高校亚热带人工林培育与利用重点实验室南宁530004 

出 版 物：《环境昆虫学报》 (Journal of Environmental Entomology)

年 卷 期：2024年第46卷第4期

页      面：998-1005页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 0904[农学-植物保护] 071007[理学-遗传学] 090402[农学-农业昆虫与害虫防治] 0713[理学-生态学] 

基　　金：国家自然科学基金(32360390 31971664) 

主　　题：桉树枝瘿姬小蜂 隐种鉴定 种特异性COI引物 快速鉴定 分子检测 

摘      要：隐种A和隐种B是桉树枝瘿姬小蜂Leptocybe invasa两种重要的全球入侵隐种,对多国林业生产造成了严重危害。由于桉树枝瘿姬小蜂体型微小,且无法从形态上区分隐种类型,给该害虫的防治造成困难。本研究基于线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基I(mtDNA COI)基因序列的种特异性(species-specific COI,SS-COI)PCR方法,研究桉树枝瘿姬小蜂隐种快速分子检测技术。基于隐种A、B的COI序列分别设计特异性SS-COI引物各1对(AF/AR和BF/BR)。使用这两对引物扩增同一桉树枝瘿姬小蜂样品DNA,即可有效进行隐种鉴定,同时两对引物也能互相验证鉴定结果。引物鉴定灵敏性检测结果显示,AF/AR与BF/BR均具有较高的鉴定灵敏性,其对DNA的有效鉴定浓度阈值分别为11.42 pg/μL和28.32 pg/μL。本研究开发的桉树枝瘿姬小蜂隐种A、B的快速鉴定方法解决了桉树枝瘿姬小蜂入侵地区隐种鉴别的难题,极大缩短鉴定时间、降低鉴定费用,为进一步探究桉树枝瘿姬小蜂隐种A、B的生物学差异以及它们对不同抗性品种桉树的适应能力提供技术参考。