基于蛋白组学探讨细辛水提物诱发肝损伤的作用机制

作     者：聂安政 边猛 朱春胜 高梅梅 NIE Anzheng;BIAN Meng;ZHU Chunsheng;GAO Meimei

作者机构：郑州大学第一附属医院中药科河南郑州450052 郑州大学第一附属医院药学部河南郑州450052 

出 版 物：《中草药》 (Chinese Traditional and Herbal Drugs)

年 卷 期：2024年第55卷第15期

页      面：5145-5153页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金青年科学基金项目(82204701) 河南省医学科技攻关计划联合共建项目(LHGJ20190274) 中华医学会临床药学分会吴阶平基金会专项科研基金课题(LCYX-Q025) 

主　　题：细辛 蛋白组学 肝损伤 细胞色素P4501A1 金属硫蛋白-1 肌肉特异性烯醇化酶3 抗原转运蛋白1 甲基丁香酚 马兜铃酸 黄樟醚 细辛脂素 

摘      要：目的基于蛋白组学探讨细辛水提物诱发肝损伤的作用机制。方法30只大鼠随机分为对照组和细辛高、低剂量(12、6 g/kg)组,每组10只,每日ig给药1次,连续28 d。末次给药后采取血清样本和肝脏样本,检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性;苏木素-伊红(hematoxylineosin,HE)染色法观察肝脏病理组织形态;串联质谱标签定量蛋白质组学法检测肝组织差异表达蛋白;免疫组化法测定大鼠肝脏组织细胞色素P4501A1(cytochrome P4501A1,CYP1A1)、金属硫蛋白-1(metallothionein-1,MT-1)、肌肉特异性烯醇化酶3(recombinant enolase 3,ENO3)、抗原转运蛋白(transporter associated with antigen processing 1,TAP1)蛋白表达。CCK-8法考察细辛水提物对小鼠肝实质AML-12细胞活力的影响,并采用qRT-PCR与Western blotting检测AML-12细胞中CYP1A1、MT-1、ENO3、TAP1蛋白及m RNA表达。结果与对照组比较,细辛组大鼠血清AST、ALT活性均显著升高(P0.01);肝组织出现明显炎性改变;肝组织中存在179个差异蛋白,主要富集于次级代谢产物的生物合成途径、视黄醇代谢途径、吞噬体等;肝组织CYP1A1、MT-1蛋白表达显著增加(P0.01),ENO3、TAP1蛋白表达显著减少(P0.01)。体外实验结果显示,细辛组AML-12细胞CYP1A1、MT-1 m RNA与蛋白表达显著增加(P0.05、0.01),ENO3、TAP1 m RNA与蛋白表达水平显著降低(P0.05、0.01)。结论细辛水提物可诱发大鼠肝损伤,引起肝功能异常和肝组织病理改变,肝损伤机制与上调CYP1A1、MT-1 m RNA及蛋白表达及下调ENO3、TAP1 m RNA及蛋白表达有关。