白藜芦醇调控肺动脉平滑肌细胞增殖的作用和分子机制

作     者：史文花 刘娟 张永红 柯蕊 Shi Wenhua;Liu Juan;Zhang Yonghong;Ke Rui

作者机构：西安交通大学第二附属医院呼吸与危重症医学科西安710004 

出 版 物：《国际呼吸杂志》 (International Journal of Respiration)

年 卷 期：2024年第44卷第7期

页      面：825-830页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(82100067) 

主　　题：肺动脉高压 肺动脉平滑肌细胞 细胞增殖 白藜芦醇 半乳糖凝集素3 Yes相关蛋白 

摘      要：目的探讨白藜芦醇(Res)调控肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的作用和分子机制。方法本研究为实验研究。体外分离培养大鼠原代PASMCs,采用免疫荧光法鉴定PASMCs,选用第3~6代细胞进行后续实验。比较不同浓度Res(10μmol/L Res干预组、30μmol/L Res干预组、100μmol/L Res干预组和300μmol/L Res干预组)对半乳糖凝集素3(Gal-3)诱导PASMCs增殖的影响,确定Res的最终干预浓度。根据给予Gal-3、Res、TD139处理和转染control干扰小RNA(siRNA)、Yes相关蛋白(YAP)siRNA的情况不同,将PASMCs分为7组:对照组(无处理)、Gal-3刺激组(30 nmol/L Gal-3刺激48 h)、Res刺激组(100μmol/L Res刺激48 h)、Res干预组(100μmol/L Res处理1 h,再加入30 nmol/L Gal-3刺激48 h)、TD139干预组(10μmol/L TD139作用1 h,再加入100μmol/L Res干预1 h和30 nmol/L Gal-3刺激48 h)、si-control组(转染control siRNA 24 h,再加入100μmol/L Res干预1 h和30 nmol/L Gal-3刺激48 h)和si-YAP组(转染YAP siRNA 24 h,再加入100μmol/L Res干预1 h和30 nmol/L Gal-3刺激48 h)。采用CCK-8实验检测PASMCs增殖能力。采用蛋白质印迹法检测对照组、Res刺激组PASMCs中Gal-3和YAP的表达水平,以及对照组、Gal-3刺激组、Res干预组和TD139干预组PASMCs中YAP的表达水平。结果Gal-3刺激组细胞增殖能力高于对照组,100μmol/L Res干预组、300μmol/L Res干预组细胞增殖能力均低于Gal-3刺激组[(1.36±0.10)比(0.87±0.13),(1.11±0.09)比(1.36±0.10),(1.00±0.11)比(1.36±0.10),均P0.05],后续实验中将100μmol/L作为Res的干预浓度。Res刺激组Gal-3和YAP的表达水平均低于对照组[(0.49±0.12)比(1.00±0.10),(0.62±0.13)比(1.00±0.09),均P0.05]。Gal-3刺激组YAP表达水平高于对照组,Res干预组YAP表达水平低于Gal-3刺激组,TD139干预组YAP表达水平低于Res干预组[(1.84±0.09)比(1.00±0.10),(1.13±0.11)比(1.84±0.09),(0.82±0.15)比(1.13±0.11),均P0.05]。Gal-3刺激组细胞增殖能力高于对照组,Res干预组细胞增殖能力低于Gal-3刺激组,TD139干预组细胞增殖能力低于Res干预组,si-YAP组细胞增殖能力低于si-control组[(1.28±0.08)比(0.77±0.09),(1.03±0.07)比(1.28±0.08),(0.82±0.10)比(1.03±0.07),(0.80±0.06)比(1.02±0.09),均P0.05]。结论Res可能通过抑制Gal-3/YAP信号通路抑制PASMCs增殖。