RNA m^(6)A甲基转移酶促进中波紫外线辐射诱导皮肤损伤的作用研究

作     者：方少芬 冯阳 张琦 朱巍 焦旸 曹建平 Fang Shaofen;Feng Yang;Zhang Qi;Zhu Wei;Jiao Yang;Cao Jianping

作者机构：放射医学与辐射防护国家重点实验室、苏州大学苏州医学院放射医学与防护学院苏州215123 

出 版 物：《中华放射医学与防护杂志》 (Chinese Journal of Radiological Medicine and Protection)

年 卷 期：2024年第44卷第7期

页      面：555-561页

核心收录：

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 100207[医学-影像医学与核医学] 1006[医学-中西医结合] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100106[医学-放射医学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(U1967220,81872552,12075165) 国家重点研发计划项目(2022YFC2503700,2022YFC2503703) 

主　　题：中波紫外线 辐射皮肤损伤 METTL14 RNA m^(6)A甲基化修饰 

摘      要：目的研究RNA m^(6)A甲基转移酶(METTL14)在中波紫外线(UVB)辐射诱导皮肤损伤中的调控作用,初步探讨靶向抑制METTL14干预UVB诱导皮肤损伤的可能性。方法C57BL/6J小鼠经150 mJ/cm^(2) UVB暴露构建辐射皮肤损伤模型,通过HE染色和Masson染色观察皮肤损伤情况,并进行病理评分。采用人永生化角质形成细胞HaCaT和人皮肤成纤维细胞WS1分别暴露于10和30 mJ/cm^(2) UVB照射,构建UVB辐射损伤细胞模型。采用RNA m^(6)A甲基化比色法定量检测上述小鼠模型皮肤组织及细胞模型受照后的m^(6)A水平,并通过Western blot法检测照射后细胞中m^(6)A相关蛋白的表达情况。采用重组腺病毒载体构建过表达METTL14的HaCaT和WS1细胞系,并通过Western blot法检测过表达效果。检测上述细胞系的m^(6)A水平;通过克隆形成实验检测上述细胞UVB暴露后的增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡的变化。采用UVB辐射皮肤损伤小鼠模型,给药组于照前和照后连续两次皮下注射METTL14抑制剂S-腺苷半胱氨酸(SAH)溶液(1、5 mg/kg),通过HE染色和Masson染色观察照射后皮肤损伤情况,进行损伤评分比较。结果150 mJ/cm^(2) UVB照射后第4天小鼠皮肤组织发生显著损伤,主要病理改变表现为皮肤炎症浸润,组织结构紊乱,胶原纤维降解,损伤评分达到极点。在10、30 mJ/cm^(2)照射后24 h,HaCaT、WS1细胞存活率均显著降低(t=7.64、7.15,P0.05)。UVB照射后第4天,小鼠皮肤组织中m^(6)A水平下调(t=3.07,P0.05)。受照后24 h,在HaCaT和WS1细胞中检测到m^(6)A水平下调(t=4.78、4.36,P0.05),METTL14蛋白表达呈时间依赖性表达下调(t=6.39、4.76,P0.05)。成功构建过表达METTL14的HaCaT和WS1细胞系,过表达METTL14上调m^(6)A水平(t=7.66、3.67,P0.05),抑制细胞UVB照射后的克隆形成能力(t=6.29、3.84、5.37、5.44,P0.05),显著增加细胞凋亡发生率(t=3.48、9.54,P0.05)。在UVB辐射皮肤损伤小鼠模型中,与生理盐水组相比,给药组(5 mg/kg SAH)的小鼠皮肤损伤病理评分明显减轻(t=3.21、4.27、5.81,P0.05),皮肤炎症浸润减少,组织结构有序,胶原纤维降解减少。结论METTL14促进皮肤细胞对UVB辐射敏感性,靶向抑制METTL14可有效缓解UVB辐射引起的皮肤损伤,有可能成为UVB辐射皮肤损伤的潜在治疗新靶点。