构建STK11基因融合质粒检测其对肺癌细胞迁移能力的影响

作     者：张鑫君 邱祥南 章龙珍 王建设 丁昕 辛勇 覃朝晖 姚元虎 

作者机构：徐州医学院附属医院放射治疗科 徐州医学院肿瘤生物治疗实验室江苏徐州221002 

出 版 物：《肿瘤防治研究》 (Cancer Research on Prevention and Treatment)

年 卷 期：2014年第41卷第7期

页      面：707-710页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：江苏省"六大人才高峰"资助项目(WSN-082) 江苏省高校自然科学资助项目(10KJD320004) 徐州医学院2012"振兴计划"资助项目 

主　　题：STK11 细胞迁移 A549 H460 

摘      要：目的构建表达STK11(serine/threonine kinase 11,STK11)基因和报告基因EGFP融合蛋白的重组质粒,并转染肺癌A549和H460细胞株,检测其对肺癌细胞迁移能力的影响。方法构建重组质粒pEGFP-STK11,双酶切和测序进行鉴定。重组质粒转染A549和H460细胞株,荧光显微镜观察EGFP蛋白表达情况,Western blot检测STK11蛋白表达情况,划痕实验检测其对肺癌细胞迁移能力的影响。结果酶切和测序结果表明pEGFP-STK11重组质粒构建成功;在转染A549和H460细胞后24h观察到绿色荧光最强;Western blot结果显示STK11蛋白在转染后24 h条带最深;划痕实验显示,转染组细胞迁移距离小于0.9%氯化钠溶液对照组(P0.05)。结论成功构建STK11基因重组质粒,并能转染A549和H460细胞,转染后对肺癌细胞迁移能力起一定抑制作用。