EZH2对结直肠肿瘤行为学的影响及其机制

作     者：武雪亮 韩磊 樊建春 路永刚 WU Xueliang;HAN Lei;FAN Jianchun;LU Yonggang

作者机构：河北北方学院附属第一医院普通外科张家口075000 河北北方学院附属第一医院肿瘤研究所 河北北方学院研究生院 河北省人民医院中心实验室 

出 版 物：《山西医科大学学报》 (Journal of Shanxi Medical University)

年 卷 期：2024年第55卷第6期

页      面：680-688页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：河北省卫计委医学科学研究重点课题计划项目(20211330) 

主　　题：EZH2 STAT3 PD-1 结直肠癌 肿瘤相关巨噬细胞 

摘      要：目的 探究EZH2对结直肠肿瘤行为学的影响及其作用机制。方法 (1)将40只BALB/c-nu裸鼠随机分为4组:EZH2-NC组、EZH2-OE组、EZH2-NC+PD1抑制剂组、EZH2-OE+PD1抑制剂组。按照LipofectamineTM2000转染法将SW480细胞稳定转染EZH2空载体质粒或EZH2过表达载体,取转染成功SW480细胞溶液分别注入小鼠右侧腋窝皮下构建皮下移植瘤模型,然后EZH2-NC+PD1抑制剂组和EZH2-OE+PD1抑制剂组小鼠尾静脉注射PD1抑制剂(150μg/mL),21 d后观察肿瘤体积。(2)SW480稳转细胞分为4组:EZH2-NC组、EZH2-OE组、EZH2-NC+PD1抑制剂组(转染成功后加入1.5 ng/mL PD1抑制剂)、EZH2-OE+PD1抑制剂组(转染成功后加入1.5 ng/mL PD1抑制剂)。将以上4组SW480细胞和THP-1细胞进行共培养,应用CCK-8实验、划痕实验、Transwell实验分别检测SW480细胞增殖、迁移和侵袭能力。应用Western blot实验检测THP-1细胞中XBP-1、Cat K、Cat L、IL-6和Arg-1的蛋白表达水平和SW480细胞中的EZH2、p-STAT3、PD-1蛋白的表达水平。结果 (1)裸鼠成瘤结果显示,与EZH2-NC组相比,EZH2-OE组肿瘤体积增大(P0.01);与EZH2-NC+PD-1组相比,EZH2-OE+PD-1抑制剂组肿瘤体积差异无统计学意义。(2)将SW480细胞和THP1细胞进行共培养后,与EZH2-NC组相比,EZH2-OE组SW480细胞增殖、迁移、侵袭能力增强(P0.01);与EZH2-NC+PD-1抑制剂组相比,EZH2-OE+PD-1抑制剂组SW480细胞增殖、迁移、侵袭能力差异无统计学意义。与EZH2-NC组相比,EZH2-OE组THP-1细胞中IL-6和Arg-1蛋白水平升高(P0.05);与EZH2-NC组相比,EZH2-NC+PD1抑制剂组IL-6和Arg-1蛋白水平下降(P0.01);与EZH2-OE组相比较,EZH2-OE+PD1抑制剂组IL-6和Arg-1蛋白水平下降(P0.01)。与EZH2-NC组相比,EZH2-OE组THP-1细胞中XBP-1、Cat K和Cat L蛋白水平升高(P0.01);与EZH2-NC组比,EZH2-NC+PD-1抑制剂组XBP-1、Cat K和Cat L蛋白水平下降(P0.01);与EZH2-OE组相比,EZH2-OE+PD-1抑制剂组XBP-1、Cat K和Cat L蛋白水平下降(P0.01)。与EZH2-NC组相比,EZH2-OE组SW480细胞中EZH2、p-STAT3和PD-1蛋白水平升高(P0.01);与EZH2-NC+PD-1抑制剂组相比,EZH2-OE+PD-1抑制剂组EZH2和p-STAT3蛋白水平升高(P0.05)。结论 EZH2通过上调STAT3/PD-1通路进而影响肿瘤相关巨噬细胞产生对结直肠癌进展发挥促进作用。