猫疱疹病毒1型病毒样颗粒在酵母中的制备及体外组装

作     者：赵梦杉 吕熙 王运航 裴辰辰 刘艺佳 郭慧琛 孙世琪 杨丰利 董虎 ZHAO Mengshan;LU Xi;WANG Yunhang;PEI Chenchen;LIU Yijia;GUO Huichen;SUN Shiqi;YANG Fengli;DONG Hu

作者机构：长江大学动物科学技术学院湖北荆州434025 中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000 榆林学院生命科学学院陕西榆林719000 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2024年第54卷第7期

页      面：866-872页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家重点研发计划项目(2022YFD1800603,2021YFD1800300) 国家自然科学基金项目(32072859,32072847,32002272) 

主　　题：猫疱疹病毒1型 病毒样颗粒 酵母表达系统 g D基因 

摘      要：为研发猫疱疹病毒1型(FHV-1)病毒样颗粒(VLPs)疫苗,将FHV-1 g D基因和自组装蛋白I301基因序列融合后克隆到pPink-HC载体中,由毕赤酵母表达重组g D蛋白。随后观察不同pH对蛋白质表达和VLPs组装效果的影响。结果显示,经SDS-PAGE和Western-blot鉴定,发现培养基pH3.0条件下毕赤酵母表达出了完整的重组g D蛋白,而pH6.0条件下表达的蛋白分子质量小于预计大小;另外,组装液pH8.0时VLPs的组装效果优于pH6.0、7.0。结果表明,酸性环境可有效抑制毕赤酵母内蛋白酶对重组g D蛋白的水解作用,重组g D蛋白可在弱碱性环境中利用自组装蛋白I301在体外完成组装,为FHV-1 VLPs疫苗制备奠定了基础。