温肾健脾活血泄浊方对慢性肾脏病大鼠肾脏转化生长因子-β-Smad2/3信号通路的作用

作     者：严胜利 谢娜 舒占钧 

作者机构：石河子大学第一附属医院中医外科 新疆医科大学附属中医医院中医药临床研究基地 

出 版 物：《环球中医药》 (Global Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2024年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：蔡钢全国名中医传承工作室建设项目(国中医药办人教函75号) 石河子大学科研项目(ZZZC2022098) 

主　　题：慢性肾脏病 温肾健脾活血泄浊方 大鼠肾组织 肾功能 肾脏纤维化 转化生长因子-β -Smad2/3 

摘      要：目的 探讨金洪元教授温肾健脾活血泄浊方对慢性肾脏病（chronickidneydisease，CKD）实验大鼠的肾脏组织内转化生长因子（transforminggrowthfactor，TGF）-β1-Smad2/3信号通路的作用。方法 将56只大鼠随机分为空白组13只，其余43只大鼠灌服腺嘌呤溶液制备CKD大鼠模型，经造模鉴定后，取10只空白组大鼠作为空白对照组，40只造模成功大鼠随机分为模型组、中药低、中、高剂量组，每组10只。中药低、中、高剂量组分别给予的灌服浓度为9.18g/（kg·d）、18.36g/（kg·d）、36.72g/（kg·d），空白对照组及模型组大鼠均灌服等体积生理盐水，连续灌服4周。经干预后，观察大鼠一般情况；运用酶联免疫吸附法检测大鼠尿液24小时尿蛋白定量、肌酐、TGF-β1及血清TGF-β1、胱抑素-C及肌酐定量水平；苏木精—伊红染色、马松（Masson）染色观察大鼠肾脏病理改变；蛋白质免疫印迹法检测大鼠肾组织内TGF-β1、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、Smad7的蛋白表达水平。结果 各组大鼠经温肾健脾活血泄浊方干预后，与模型组相比，中药低、中、高剂量组大鼠尿液中TGF-β1、肌酐、24小时尿蛋白定量水平显著下降（P0.05）；血清中TGF-β1、胱抑素-C及肌酐定量显著降低，且中药高、中、低剂量组大鼠血清TGF-β1、胱抑素-C及肌酐定量水平均随着中药剂量增加而降低，具有负相关性，差异有统计学意义（P0.05）。与模型组比较，中药低、中、高剂量组大鼠肾组织中TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白定量显著降低，且随着中药剂量增加而降低，但差异无统计学意义；Smad7随中药剂量增加而升高，且差异有统计学意义（P0.05），具有正相关性。苏木精—伊红染色结果示：中药各剂量组大鼠肾小管病变程度较模型组显著降低，纤维化面积较模型组明显减少；中药低、中、高剂量组较模型组大鼠肾组织结构紊乱程度降低，肾间质炎性细胞浸润减少，纤维组织减少；中药中、高剂量组较中药低剂量组大鼠肾组织炎性细胞浸润稍显减少，肾组织结构稍显整齐。马松染色结果示：中药低、中、高剂量组较模型组大鼠肾脏间质纤维组织增生程度均降低，纤维化比例减少，但组间肾脏间质纤维组织增生程度差异不明显。结论 温肾健脾活血泄浊方可有效逆转CKD大鼠肾组织损伤，并且可能是通过TGF-β1-Smad2/3通路下调TGF-β1的水平来发挥作用，进而改善CKD大鼠肾组织纤维化。