lncRNA MEG8通过调控miR-367-3p/PTEN介导慢性阻塞性肺疾病发展的分子机制研究

作     者：王熠 成诚 黄飞 童国强 WANG Yi;CHENG Cheng;HUANG Fei;TONG Guoqiang

作者机构：九江市第一人民医院呼吸科江西九江332000 

出 版 物：《国际检验医学杂志》 (International Journal of Laboratory Medicine)

年 卷 期：2024年第45卷第13期

页      面：1595-1601页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：江西省卫生建康委科技计划项目(202211812) 

主　　题：慢性阻塞性肺疾病 lncRNA MEG8 miR-367-3p 磷酸酶张力蛋白同源物基因 细胞凋亡 炎症因子 

摘      要：目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)MEG8通过调控miR-367-3p/磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)介导慢性阻塞性肺疾病(COPD)发展的分子机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测16HBE细胞和COPD组织lncRNA MEG8表达水平;在香烟烟雾提取物(CSE)刺激后的16HBE细胞中过表达lncRNA MEG8及加入miR-367-3p inhibitor后同时敲减lncRNA MEG8或PTEN,采用MTT法、流式细胞术、酶联免疫吸附试验和免疫印迹法检测细胞凋亡、细胞增殖和炎症因子水平的变化;利用双荧光素酶报告系统对lncRNA MEG8、miR-367-3p、PTEN的靶向关系进行验证。结果 MEG8在CSE刺激的16HBE细胞和COPD临床组织样本中表达降低(P0.05)。相比于CSE组,过表达MEG8后CSE刺激的16HBE细胞凋亡和炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平降低(P0.05),促凋亡蛋白Bax、Caspase3和Cleaved-caspase3表达水平降低(P0.05),凋亡抑制因子Bcl-2表达水平升高(P0.05)。双荧光素酶报告基因实验验证了MEG8可靶向抑制miR-367-3p(P0.05),同时miR-367-3p可靶向抑制PTEN的表达(P0.05),进而抑制CSE刺激的16HBE细胞的凋亡和炎症反应(P0.05)。在CSE刺激下,相较于Control组,加入miR-367-3p inhibitor可显著上调16HBE细胞中PTEN的蛋白表达水平(P0.05),增强细胞增殖活性(P0.05),减少细胞凋亡(P0.05),显著下调促凋亡蛋白Bax、Caspase 3和Cleaved-caspase3的表达水平(P0.05),上调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平(P0.05),抑制炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平(P0.05),随后敲降MEG8或PTEN可恢复PTEN的蛋白表达水平(P0.05),抑制细胞增殖活性(P0.05),逆转miR-367-3p inhibitor导致的细胞凋亡(P0.05)以及对凋亡相关蛋白的调控作用(P0.05),增强炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平(P0.05)。结论 MEG8通过调控miR-367-3p/PTEN轴抑制CSE刺激的16HBE细胞的凋亡和炎症反应,并可能为临床COPD的治疗提供新的治疗策略。