初步比较6种荧光PCR试剂盒对肠道病毒核酸的检测效果

作     者：梁志超 林长缨 杨扬 崔淑娟 高志勇 黄瑛 张新 李仁清 Liang Zhichao;Lin Changying;Yang Yang;Cui Shujuan;Gao Zhiyong;Huang Ying;Zhang Xin;Li Renqing

作者机构：北京市疾病预防控制中心传染病地方病控制所100013 北京市疾病预防控制中心性病艾滋病防治所100013 

出 版 物：《国际病毒学杂志》 (International Journal of Virology)

年 卷 期：2024年第31卷第3期

页      面：206-210页

学科分类：100208[医学-临床检验诊断学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：北京市自然科学基金-海淀原始创新联合基金(L192012) 首都卫生发展科研专项(首发2020-2-1012) 国家重点研发计划(2023YFC2308705) 

主　　题：手足口病 肠道病毒 实时荧光PCR 

摘      要：目的初步比较6种品牌肠道病毒EV-A71/CVA16/肠道通用核酸检测试剂盒CVA6/CVA10核酸检测试剂盒的灵敏度和特异性,为检测试剂的选择及疾病监测提供参考。方法选择EV-A71、CVA16、CVA6和CVA10四种血清型毒株作为样本盘,分别10倍梯度稀释。使用数字PCR对梯度稀释的病毒进行核酸定量后,制备混合样本盘并进行倍比稀释,使用实时荧光PCR方法检测。分析各试剂盒的检出限及灵敏度;检测非肠道病原的核酸,分析其特异度;通过分组打分和量化评分法评价扩增曲线特征及Ct值结果,进行综合评分。结果对灵敏度的比较分析中,试剂盒E、A和F检测较为灵敏;在扩增曲线及Ct值分析中,按分值排名检测EV通用的试剂前3为A、C、E;检测EV-A71中前3名为E、A、F;检测CVA16的试剂中,前3名为A、D、E;检测CVA6的试剂前3名为E、D、F;检测CVA10的试剂中,前3名的为E、A、C。各品牌的特异性均较好。结论在EV-A71/CVA16/EV通用3重荧光PCR检测试剂盒中,A、E、C和D综合评分较高,在CVA6/CVA10双重荧光PCR检测试剂盒中E、F综合评分较高,建议在检测肠道病毒相关的监测及疫情样本时,常备两种品牌及以上试剂盒对检测结果相互比较验证,并对扩增曲线和Ct值结果综合判断。本研究的量化评分方法可为其他荧光PCR检测试剂盒评价提供参考。