降糖通脉方提取物对糖尿病肺损伤大鼠肺成纤维细胞的影响及机制

作     者：丁念 郑承红 

作者机构：武汉市中医医院内科 

出 版 物：《中药材》 (Journal of Chinese Medicinal Materials)

年 卷 期：2024年

页      面：1536-1541页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：湖北省自然科学基金项目(2019CFB633) 武汉市卫生健康委重点科研项目(WZ20A06) 湖北省中医药管理局中医药科研项目(ZY2023F053) 武汉市科技局知识创新专项项目(2022020801010582) 

主　　题：降糖通脉方 糖尿病 肺损伤 TGF-β /Smads信号通路 成纤维细胞 

摘      要：目的:探讨降糖通脉方提取物对糖尿病肺损伤大鼠肺成纤维细胞的影响及机制。方法:将糖尿病肺损伤模型大鼠肺损伤成纤维细胞传代3代,通过显微镜观察和免疫组化鉴定糖尿病肺损伤成纤维细胞造模是否成功。使用CCK-8法确认降糖通脉方的处理时间和处理浓度。以正常肺成纤维细胞为空白对照组,传代3代的肺损伤成纤维细胞分为模型组及降糖通脉方低（5 mg/mL）、中（10 mg/mL）、高（20 mg/mL）浓度组。流式细胞仪检测细胞凋亡率,ELISA法检测细胞上清中IL-6、TNF-α、IL-1β水平,qRT-PCR和Western Blot分别检测细胞中SnoN和TGF-β/Smads通路相关mRNA及蛋白表达。结果:糖尿病肺损伤大鼠肺成纤维细胞传代3代后,细胞形态变化规律稳定,Vimentin、α-SMA的表达和正常肺成纤维细胞相似。模型组细胞凋亡率显著低于空白对照组（P0.05）,而降糖通脉方各组细胞凋亡率显著高于模型组（P0.05）。模型组细胞IL-6、TNF-α、IL-1β分泌显著高于空白对照组（P0.05）,而降糖通脉方处理组IL-6、TNF-α、IL-1β分泌显著低于模型组（P0.05）。与空白对照组比较,模型组细胞TGF-β1mRNA及蛋白表达和Smad2、Smad3 mRNA表达及蛋白磷酸化水平显著升高（P0.05）,SnoN、mRNA及蛋白表达和Smad7 mRNA表达及蛋白磷酸化水平显著降低（P0.05）,与模型组比较,降糖通脉方各组TGF-β1mRNA及蛋白表达和Smad2、Smad3 mRNA及蛋白磷酸化水平显著降低,SnoN mRNA及蛋白表达和Smad7 mRNA及蛋白磷酸化水平显著升高（P0.05）。结论:降糖通脉方提取物能通过调控TGF-β1/Smads信号通路和SnoN治疗糖尿病造成的肺损伤。