lncRNA MIAT调控miR-539-5p对过氧化氢诱导的心肌细胞氧化应激损伤的保护作用及机制

作     者：潘敏丽 卢宏全 黄国定 蔡冠虎 

作者机构：海南西部中心医院健康体检科海南儋州571700 海南西部中心医院肿瘤内科海南儋州571700 

出 版 物：《中国老年学杂志》 (Chinese Journal of Gerontology)

年 卷 期：2024年第44卷第13期

页      面：3266-3270页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：海南省卫生计生行业科研项目(15A200003) 

主　　题：心肌梗死相关转录本(MIAT) 微小RNA(miR)-539-5p 过氧化氢(H_(2)O_(2)) 心肌细胞 炎症反应 凋亡 

摘      要：目的探究长链非编码RNA(lncRNA)心肌梗死相关转录本(MIAT)调控微小RNA(miR)-539-5p对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞氧化应激损伤的保护作用及机制。方法将大鼠心肌细胞H9c2分为Con组(空白培养细胞)、H_(2)O_(2)组(100μmol/L H_(2)O_(2)处理细胞)、H_(2)O_(2)+si-NC组(转染si-NC后加H_(2)O_(2)处理)、H_(2)O_(2)+si-MIAT组(转染si-MIAT后加H_(2)O_(2)处理)、H_(2)O_(2)+miR-NC组(转染miR-NC后加H_(2)O_(2)处理)、H_(2)O_(2)+miR-539-5p组(转染miR-539-5p后加H_(2)O_(2)处理)、H_(2)O_(2)+si-MIAT+anti-miR-NC组(共转染si-MIAT和anti-miR-NC后加H_(2)O_(2)处理)、H_(2)O_(2)+si-MIAT+anti-miR-539-5p组(共转染si-MIAT和anti-miR-539-5p后加H_(2)O_(2)处理)。实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测MIAT和miR-539-5p相对表达量;流式细胞术实验检测细胞凋亡;Western印迹实验检测切割型胱天蛋白酶(Cleaved-caspase)3蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量;双荧光素酶报告实验测定MIAT和miR-539-5p相互作用。结果与Con组比较,H_(2)O_(2)组心肌细胞中MIAT相对表达量明显增加,凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达、MDA含量明显增加,miR-539-5p相对表达量、SOD活性、GSH-Px活性明显降低(P0.05)。干扰MIAT或过表达miR-539-5p明显降低H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达、MDA含量,明显增加SOD活性、GSH-Px活性。MIAT调控miR-539-5p表达,下调miR-539-5p能够逆转敲低MIAT对以上指标的作用。结论敲低MIAT可抑制H_(2)O_(2)刺激的H9c2氧化损伤和凋亡,其机制可能与miR-539-5p上调有关。