珠芽魔芋原生质体制备体系优化及瞬时转化
作者机构:昆明理工大学生命科学与技术学院
出 版 物:《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)
年 卷 期:2024年
学科分类:09[农学] 0902[农学-园艺学] 090202[农学-蔬菜学]
摘 要:为探明不同因素对珠芽魔芋叶肉原生质体分离、酶解过程的影响,建立瞬时转化体系,本研究以珠芽魔芋幼苗为材料,进行了酶用量、叶片用量、酶解时间、酶解温度等在不同水平条件下对原生质体分离影响的研究。结果表明,纤维素酶和离析酶分别在2.0%:0.1%、叶片0.1 g/mL、温度为30 ℃的暗环境中酶解6 h时,酶解效率最高;应用PEG法成功将绿色荧光蛋白(GFP)表达载体pri101-GFP瞬时转化到珠芽魔芋原生质体中,且在受体中获得表达。珠芽魔芋悬浮细胞原生质体的最佳制备条件及瞬时转化体系的研究,后续可以研究珠芽魔芋抗软腐病等转基因植物,提高魔芋抗病能力,增加葡甘聚糖产量。