基于脂质组学探究越鞠丸对抑郁小鼠的治疗作用

作     者：张振涛 苏丹 李惠珍 宋永贵 徐焕华 赖美茜子 艾志福 

作者机构：江西中医药大学江西省中医药管理局抑郁症中医证候动物模型重点研究室中药药效(防治精神障碍脑疾病)评价江西省中医药管理局重点研究室 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(82060808) 江西省自然科学基金重点项目(20232ACB206052、20232ACB206056) 江西省中医药管理局科技计划重点项目(2022Z004) 国家中医药多学科交叉创新团队项目(ZYYCXTD-D-202207) 江西中医药大学科技创新团队项目(CXTD22008) 

主　　题：越鞠丸 抑郁症 脂质组学 神经行为学 血脂 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/核糖体蛋白S6激酶(mTOR/S6K)信号通路 

摘      要：目的：基于脂质组学研究越鞠丸对抑郁小鼠血清、前额叶皮层、海马区脂质代谢的影响，探讨其改善脂质代谢防治抑郁的可能途径。方法：7周龄的C57小鼠随机分为空白组、模型组、越鞠丸组(3.6 g·kg-1)和氟西汀组(10 mg·kg-1)，采用慢性不可预知应激诱导的抑郁模型；造模和给药结束后，通过糖水偏好实验、旷场实验、悬尾实验、强迫游泳实验等神经行为学指标评价越鞠丸抗抑郁药效；采用全自动生化分析仪检测小鼠血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）指标，评价越鞠丸对抑郁状态下脂质代谢的影响；采用超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱质谱法（UPLC-LTQ-Orbitrap MS）结合偏最小二乘判别分析开展小鼠血清、前额叶皮层、海马区脂质组学研究；采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠胃组织中脂质代谢上游哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、核糖体蛋白S6激酶（S6K）、磷酸化mTOR（p-mTOR）、p-S6K蛋白的表达情况。结果：与空白组比较，模型组小鼠糖水偏好率和旷场中心运动时间显著减少（P0.01），悬尾不动时间和强迫游泳不动时间显著增加（P0.01），血清TC、TG、LDL-C、HDL-C、AST和ALT水平显著升高（P0.01，P0.05）。越鞠丸治疗2周后，与模型组比较，越鞠丸组小鼠的糖水偏好率和旷场中心运动时间显著增加（P0.01），悬尾不动时间和强迫游泳不动时间显著减少（P0.01），血清TC、TG、LDL-C、AST和ALT水平显著降低（P0.05，P0.01）；脂质组学分析显示，越鞠丸影响了血清、前额叶皮层、海马区的脂质代谢，分别筛选得到23种、222种、45种差异脂质代谢物，其对前额叶皮层脂质代谢的影响相对海马区更为明显，提示越鞠丸对抑郁小鼠不同脑区脂质代谢物的调控具有区域特异性。差异脂质主要富集于甘油磷脂代谢通路、鞘脂信号通路和糖基磷脂酰肌醇-锚定蛋白生物合成等通路上，其中又以甘油磷脂的代谢通路最为显著。Western blot结果显示，与空白组比较，模型组小鼠胃组织中p-mTOR、p-S6K蛋白的相对表达水平显著升高（P0.01）。与模型组比较，越鞠丸组小鼠胃组织中p-mTOR、p-S6K蛋白的相对表达水平显著降低（P0.01）。结论：越鞠丸对脂质代谢的干预是其发挥抗抑郁效应的潜在途径之一，可能与胃中脂质代谢上游mTOR/S6K信号通路的调控相关。