丹参Salvia miltiorrhiza叶片快速成苗遗传转化体系研究
作者机构:鲁东大学农林工程研究院 鲁东大学农学院
出 版 物:《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)
年 卷 期:2024年
学科分类:1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 10[医学]
基 金:2022年山东省高等学校“青创团队计划”项目(2022KJ120)资助
摘 要:丹参是中国大宗常用中药材之一,在全国大部分地区均有分布。丹参种质复杂,且易产生变异类型特征使得丹参品种选育工作严重制约丹参产业的发展。为此,高效和稳定的再生体系建立和遗传转化体系优化是丹参生产和研究中必不可少的基础。本研究利用山东丹参作为研究材料,建立和构建了丹参叶片快速成苗法再生体系与稳定的根癌农杆菌遗传转化体系,为定向分子设计育种奠定基础。丹参再生体系建立阶段,采用不定芽分化培养基(MS519 2.4 g/L+MES 0.5 g/L+NAA 0.05 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂7 g/L),能够直接诱导丹参叶片产生大量不定芽,且相比愈伤组织诱导法缩短20 d以上。遗传转化研究发现,在菌液浓度OD600=0.8,侵染时间10 min条件下,叶片快速成苗法进行丹参遗传转化的阳性不定芽出芽效率最高。研究结果对丹参叶片快速成苗法遗传转化体系的建立,大幅度提高了丹参叶片不定芽诱导效率与农杆菌遗传转化效率,为丹参基因功能研究与分子育种的开展奠定基础。