基于角蛋白源特征肽检测优化的角类动物药鉴别研究

作     者：黄潇正 武文星 黄思莹 包旺林 冯旗园 赵明 段金廒 刘睿 HUANG Xiao-zheng;WU Wen-xing;HUANG Si-ying;BAO Wang-lin;FENG Qi-yuan;ZHAO Ming;DUAN Jin-ao;LIU Rui

作者机构：南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心国家中医药管理局中药资源循环利用重点研究室江苏南京210023 动物类中药与功能肽国际合作联合实验室江苏南京210023 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2024年第49卷第9期

页      面：2402-2409页

核心收录：

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81973450) 国家重点研发计划项目(2018YFC1706100) 江苏省高校“青蓝工程”中青年学术带头人项目 江苏省农业科技自主创新项目(CX(22)3173) 南京中医药大学中药学一流学科开放课题(2020YLXK009)。 

主　　题：角类动物药 前处理优化 特征肽 高效液相色谱-串联质谱法 质量控制 

摘      要：由于角蛋白结构稳定,富含角蛋白的角类动物药提取溶解步骤复杂,严重制约了检测效率及通量,该文通过简化角类样品前处理步骤,优化主要角类动物药的特征肽检测方法,提升角类动物药专属性鉴别效率。分别对经/未经碘乙酰胺(IAA)处理的角类动物药特征肽类进行分析,优化特征肽的离子对条件,并比较经/未经IAA处理的特征肽的保留时间、响应值等数据;采用直接酶解与提取总蛋白后酶解2种前处理方法制备角类动物药样品,基于特征肽保留时间、离子响应值等比较不同方法对羚羊角、水牛角、山羊角及牦牛角样品中特征肽检测的影响。结果表明待测角类样品经直接酶解的简化工艺处理后,均可检测到未经IAA处理的特征肽信息,且与IAA处理后的特征肽相比,其保留时间后移,质谱响应稍有降低;未经IAA处理的特征肽专属性良好,不影响角类动物药的专属性鉴别。综上,可采用直接酶解的工艺处理角类样品,省略蛋白质提取、二硫苏糖醇、IAA试剂处理步骤,显著提高前处理效率,且不影响角类动物药的专属性鉴别,为角类动物药质量研究及标准提升提供了思路与策略。