调脾安肠方对伊立替康致迟发性腹泻小鼠肠道菌群的影响

作     者：孙小梅 苏菲 刘猛 王佳聪 程志强 SUN Xiaomei;SU Fei;LIU Meng;WANG Jiacong;CHENG Zhiqiang

作者机构：北京中医药大学北京100029 中日友好医院北京100029 

出 版 物：《现代中西医结合杂志》 (Modern Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine)

年 卷 期：2024年第33卷第9期

页      面：1169-1180页

学科分类：10[医学] 

基　　金：中央高水平医院临床科研业务费资助项目(2022-NHLHCRF-LX-02-0109) 中日友好医院科研基金资助项目(2019-1-QN-56) 

主　　题：调脾安肠方 伊立替康 迟发性腹泻 肠道菌群 β-葡萄糖醛酸苷酶 

摘      要：目的研究调脾安肠方对伊立替康致迟发性腹泻小鼠肠道菌群结构及其毒性代谢产物活性的影响。方法将32只健康BALB/c雌性小鼠随机分为空白组、模型组、调脾安肠方组、黄连素组,每组8只。除空白组外,其余3组小鼠制备CT26皮下荷瘤模型后再建立伊立替康致迟发性腹泻模型,从伊立替康腹腔注射当天开始,调脾安肠方组每天于化疗前2 h给予调脾安肠方浓缩制剂0.4 mL(28 g/kg)灌胃,模型组每天于化疗前2 h给予生理盐水0.4 mL灌胃,黄连素组每天于化疗前2 h给予盐酸小檗碱片水溶液0.4 mL灌胃(100 mg/kg),空白组与造模组相同时间段给予生理盐水0.4 mL灌胃,均连续灌胃10 d。于实验结束后当天留取各组小鼠粪便,分光光度法检测粪便样本中β-葡萄糖醛酸苷酶活性,16S rRNA高通量测序技术检测样本中肠道菌群结构及分布情况。结果模型组β-葡萄糖醛酸苷酶活性明显高于空白组(P0.05);调脾安肠方组及黄连素组β-葡萄糖醛酸苷酶活性均明显低于模型组(P均0.05),且调脾安肠方组明显低于黄连素组(P0.05)。粪便样本测序显示,模型组小鼠肠道菌群物种丰度、均匀度及多样性下降,而调脾安肠方组小鼠肠道菌群物种丰度、均匀度及多样性均得到逆转,趋近于正常小鼠,且在菌群物种组成上与空白组相似,黄连素组与模型组相似;空白组及调脾安肠方组OTUs数量较多,其次为黄连素组,模型组数量最少;肠道菌群物种门水平分析,各组样本中厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度均较高,其中疣微菌门(Verrucomicrobia)、变形菌门(Proteobacteria)在模型组样本中具有较高丰度;肠道菌群物种属水平分析,乳杆菌属(Lactobacillus)在各组均有较高丰度,模型组样本中阿克曼菌属(Akkermansia)、拟杆菌属(Bacteroides)丰度降低,调脾安肠方组丰度上调至接近正常水平;各组OTUs相比,模型组小鼠肠道菌群中丹毒丝菌目、梭菌目、疣微菌目、伯克菌目、红蝽菌目数量上调,调脾安肠方组小鼠肠道菌群中厚壁菌门、双歧杆菌目、拟杆菌目和乳杆菌目菌群数量增加;模型组的标志物种包括肠球菌科、肠球菌属、帕拉普菌科、普雷沃菌属等,调脾安肠方组的标志物种包括双歧杆菌目、双歧杆菌科、双歧杆菌属及拟杆菌目的S24-7科等,黄连素组的标志物种包括颤螺菌属、副拟杆菌属、粪球菌属、瘤胃球菌属和紫单胞菌科等。结论伊立替康会导致小鼠肠道菌群物种丰度、均匀度及多样性下降,增加β-葡萄糖醛酸苷酶活性,调脾安肠方可调节肠道菌群结构并降低毒性代谢产物活性。