基于NLRP6表达探究miR-9对脑缺血再灌注大鼠神经损伤修复及TGF-β/Smad表达的影响

作     者：孔博 王富君 韩斌 朱晓东 余云湖 韩光魁 

作者机构：济宁医学院附属医院山东济宁272000 

出 版 物：《中国老年学杂志》 (Chinese Journal of Gerontology)

年 卷 期：2024年第44卷第11期

页      面：2790-2794页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

主　　题：人含NLR家族Pyrin域蛋白(NLRP)6 微小RNA(miR)-9 脑缺血再灌注 神经损伤修复 转化生长因子(TGF)-β/Smad 

摘      要：目的基于人含NLR家族Pyrin域蛋白(NLRP)6表达探究微小RNA(miR)-9对脑缺血再灌注(CI/R)大鼠神经损伤修复及转化生长因子(TGF)-β/Smad水平的影响。方法79只SPF级SD大鼠随机抽取15只大鼠为健康组进行对照,剩余64只大鼠建立CI/R模型,建模过程中意外死亡4只,剩余60只随机分为模型组、miR-9抑制组、NLRP6 siRNA组、联合组各15只。miR-9抑制组:于大鼠前囟左侧0.8 mm,后侧1.0 mm,深度4.0 mm,注射100μmol/L的LAN-miR-92μl;NLRP6 siRNA组:筛选最佳干扰效果的小分子RNA,使用焦碳酸二乙酯(DEPC)水溶解小分子干扰片段至终浓度为2μl/μg,调节微量注射泵使深度为3.5 mm,共10μl以1μl/min的速度进行侧脑室注射;联合组在miR-9抑制组的基础上给予NLRP6 siRNA组处理;健康组与模型组给予等体积的生理盐水。检测各组神经功能缺损评分、脑梗死体积,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组NLRP6、miR-9 mRNA表达,苏木素-伊红(HE)染色观察各组脑组织病理形态,TUNEL检测各组神经细胞凋亡,Western印迹检测各组TGF-β、Smad2/3、Smad4、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3蛋白表达。结果与健康组相比,其余4组神经功能缺损评分及脑梗死体积、NLRP6、miR-9 mRNA表达、TGF-β、Smad2/3、Smad4、Caspase-3蛋白表达明显升高(P0.05);联合组神经功能缺损评分及脑梗死体积、NLRP6、miR-9 mRNA表达、Caspase-3蛋白表达明显低于miR-9抑制组与NLRP6 siRNA组,TGF-β、Smad2/3、Smad4蛋白表达明显高于miR-9抑制组及NLRP6 siRNA组(P0.05);联合组神经细胞凋亡率明显低于miR-9抑制组与NLRP6 siRNA组(P0.05)。结论miR-9通过调控NLRP6表达抑制神经细胞凋亡,促进神经损伤修复,发挥脑保护作用,其机制可能与调控TGF-β/Smad通路有关。