ROS介导Nrf2/HO-1通路在纳米MnO_(2)致BV2小胶质细胞氧化损伤中的作用

作     者：覃镡 孙兴昌 梁高峰 常旭红 朱慧科 张佳豪 张丹 冯三畏 孙应彪 QIN Xin;SUN Xing-chang;LIANG Gao-feng;CHANG Xu-hong;ZHU Hui-ke;ZHANG Jia-hao;ZHANG Dan;FENG San-wei;SUN Ying-biao

作者机构：兰州大学公共卫生学院卫生毒理学系甘肃兰州730000 兰州石化总医院职业病研究所甘肃兰州730060 

出 版 物：《毒理学杂志》 (Journal of Toxicology)

年 卷 期：2024年第38卷第2期

页      面：95-100页

学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：甘肃省科技计划项目重点研发计划(21YF5FA113) 

主　　题：纳米MnO_(2) BV2小胶质细胞 ROS Nrf2/HO-1通路 氧化损伤 

摘      要：目的探讨ROS介导的Nrf2/HO-1通路在纳米(Nano)MnO_(2)诱导的BV2小胶质细胞氧化损伤中的作用。方法采用2.5、5.0和10.0μg/ml Nano MnO_(2)和活性氧(ROS)清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)单独或联合处理BV2细胞12 h,分别建立细胞毒性和干预模型。采用DCFH-DA荧光探针检测细胞ROS水平,生化试剂盒检测细胞SOD、GSH-Px、MDA含量及·OH清除能力,Western blot及细胞免疫荧光技术检测细胞Nrf2/HO-1通路相关蛋白表达水平。结果Nano MnO_(2)可致BV2细胞活力降低,细胞膜损伤程度增加,并呈剂量依赖性(F_(细胞活力)=126.648、F_(LDH)=17.394,P0.05)。与对照组相比,Nano MnO_(2)组BV2细胞中ROS水平升高(F=16.584,P0.05),Nano MnO_(2)高剂量组细胞SOD和GSH-Px活力明显降低(F_(SOD)=17.394、F_(GSH-Px)=16.584,P0.05);而Nano MnO_(2)中和高剂量组细胞·OH清除能力降低,MDA含量明显增高(F_(·OH清除能力)=5.352、F_(MDA)=5.478,P0.05)。Nano MnO_(2)中和高剂量组BV2细胞中Nrf2蛋白磷酸化水平明显升高的同时也出现明显的Nrf2核易位现象,且HO-1蛋白表达水平亦明显升高(F_(p-Nrf2)=8.608、F_(HO-1)=7.769,P0.05)。采用ROS清除剂NAC处理BV2细胞后,Nano MnO_(2)激活的BV2细胞Nrf2/HO-1通路被抑制(F_(p-Nrf2)=11.05、F_(HO-1)=10.19,P0.05)。结论Nano MnO_(2)可诱导BV2小胶质细胞内ROS过量生成而致氧化应激,进而通过活化Nrf2/HO-1通路而发挥抗氧化损伤作用,但其对细胞毒性主要以氧化损伤为主。