电针对早发性卵巢功能不全大鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响

作     者：张怡 黄思丹 师旭亮 张丹妮 李欣悦 佘延芬 ZHANG Yi;HUANG Sidan;SHI Xuliangg;ZHANG Danni;LI Xinyue;SHE Yanfen

作者机构：河北中医药大学针灸推拿学院石家庄050091 河北省中医针灸优势病症国际联合研究中心石家庄050091 河北中医药大学窦汉卿学术思想研究院石家庄050200 

出 版 物：《中国针灸》 (Chinese Acupuncture & Moxibustion)

年 卷 期：2024年第44卷第6期

页      面：676-684页

核心收录：

学科分类：1005[医学-中医学] 100512[医学-针灸推拿学] 10[医学] 

基　　金：河北省自然科学基金资助项目:H2022423371 国家自然科学基金资助项目:81973755 河北省中医药管理局科研计划项目:2022093 河北中医药大学“大学生创新创业训练计划”项目:202314432023 

主　　题：早发性卵巢功能不全 电针 公孙 卵巢颗粒细胞 自噬 

摘      要：目的:观察电针对早发性卵巢功能不全(POI)模型大鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响,探讨电针改善POI的作用机制。方法:从32只雌性SD大鼠中随机选取8只作为空白组,剩余大鼠作为造模组腹腔注射环磷酰胺15d(第1天剂量为50 mg/kg,第2天到第15天剂量为8 mg/kg)建立POI模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、电针组和雌二醇组,每组8只。电针组大鼠予电针双侧“公孙,连续波,频率2 Hz,电流强度0.1~1 mA,每日1次,每次20 min,共14 d。雌二醇组大鼠予戊酸雌二醇溶液(0.01 mg/mL)灌胃(10 mL/kg),每日1次,共14d。造模前后采用快速革兰氏染色观察大鼠动情周期变化。干预后,采用HE染色法观察大鼠卵巢组织形态;ELISA法检测大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、抗苗勒管激素(AMH)、抑制素B(INHB)含量;免疫荧光染色法观察大鼠卵巢颗粒细胞p62阳性表达;透射电镜观察大鼠卵巢颗粒细胞结构,并比较自噬小体和自噬溶酶体数量;Westernblot法和实时荧光定量PCR法检测大鼠卵巢组织p62、Beclin-1、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)蛋白和mRNA表达。结果:空白组大鼠阴道涂片结果呈规律的周期变化;造模组大鼠阴道涂片表现为动情周期延长或周期停滞,多处于动情前期或动情间期,卵巢整体萎缩,整体结构紊乱,颗粒细胞减少。与空白组比较,模型组大鼠血清FSH含量升高(P0.01),E2、AMH和INHB含量降低(P0.01);卵巢颗粒细胞p62阳性表达减少(P0.01);卵巢颗粒细胞明显肿胀,线粒体轻中度肿胀,粗面内质网略显扩张,高尔基体肥大,卵巢自噬小体和自噬溶酶体数量增加(P0.01);卵巢组织p62蛋白及mRNA表达降低(P0.01),Beclin-1、LC3蛋白表达及mRNA表达升高(P0.01)。与模型组比较,电针组和雌二醇组大鼠血清FSH含量下降(P0.01),E2、AMH和INHB含量升高(P0.01);卵巢颗粒细胞p62阳性表达增加(P0.01);卵巢颗粒细胞损伤程度有所缓解,细胞器形态较为完整,卵巢自噬小体和自噬溶酶体数量减少(P0.01);卵巢组织p62蛋白和mRNA表达升高(P0.01),Beclin-1、LC3蛋白和mRNA表达降低(P0.01)。结论:电针“公孙可通过减少自噬小体和自噬溶酶体数量,上调p62表达,下调Beclin-1、LC3表达,从而抑制卵巢颗粒细胞自噬,调节大鼠血清FSH、E2、AMH和INHB水平,改善POI卵巢储备功能。