犬PD-1单克隆抗体的筛选与鉴定

作     者：王卓 徐司雨 夏兴霞 李志敏 毕振威 钱晶 莫菲 诸玉梅 王永山 孙树民 谭业平 WANG Zhuo;XU Si-yu;XIA Xing-xia;LI Zhi-min;BI Zhen-wei;QIAN Jing;MO Fei;ZHU Yu-mei;WANG Yong-shan;SUN Shu-min;TAN Ye-ping

作者机构：内蒙古民族大学内蒙古通辽028000 江苏省农业科学院兽医研究所农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 

出 版 物：《中国兽药杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Drug)

年 卷 期：2024年第58卷第5期

页      面：10-16页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主　　题：犬 PD-1 单克隆抗体 肿瘤 

摘      要：为筛选犬程序性死亡受体1(cPD-1)单克隆抗体,以原核表达并纯化复性的cPD-1胞外区蛋白为靶抗原免疫BALB/c小鼠,应用单克隆抗体杂交瘤细胞技术和间接ELISA方法,经3轮轮筛选和克隆化,获得1株能稳定分泌抗cPD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株1F9。间接ELISA检测显示1F9杂交瘤细胞株连续传代培养能稳定分泌单克隆抗体,效价达到1∶2048,亚型鉴定重链为IgG1,轻链为κ;以HEK293细胞表达cPD-1胞外区蛋白为检测抗原,Western-blot和间接免疫荧光试验进行鉴定,结果显示1F9单克隆抗体能特异性结合cPD-1胞外区蛋白。本研究通过小鼠杂交瘤技术成功筛选到1株鼠源cPD-1单克隆抗体。