猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like株的分离鉴定及基因组分析

作     者：毛丽萍 潘晓梅 曹剑 李俊辉 周涛 侯红娟 郑学功 贺笋 MAO Li-ping;PAN Xiao-mei;CAO Jian;LI Jun-hui;ZHOU Tao;HOU Hong-juan;ZHENG Xue-gong;HE Sun

作者机构：天康制药股份有限公司新疆乌鲁木齐830011 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2024年第45卷第7期

页      面：11-17页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：丝绸之路经济带创新驱动发展试验区乌昌石国家自主创新示范区科技发展计划项目(2022LQ03022) 

主　　题：猪繁殖与呼吸综合征病毒 类NADC30 猪骨髓源巨噬细胞 Nsp2 重组分析 

摘      要：猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)呈现全球流行,对养猪行业造成巨大的经济损失。为增加PRRSV分离细胞种类的多样性,同时了解新疆地区猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)遗传变异的现状,采用新鲜制备猪骨髓细胞诱导分化成猪骨髓源巨噬细胞,对新疆地区某猪场疑似患有PRRS的肺脏,接种至猪骨髓源巨噬细胞,分离获得1株PRRSV毒株,命名为XJYQ-2021。通过测序得到全基因组序列,对该毒株NSP2氨基酸序列缺失、ORF5及全基因组序列进行同源性、遗传进化及重组分析;利用间接免疫荧光试验进行鉴定,同时对第10、15、20代病毒液绘制生长曲线。结果显示,诱导分化的猪骨髓源巨噬细胞纯度高达90%以上,XJYQ-2021分离株在该细胞生长良好,可见明显细胞病变;通过生长曲线可观察到病毒含量随代次增加而递增,感染48 h左右病毒滴度达到峰值;该分离株基因组全长15030 nt,与美洲型NADC30同源性为90%;XJYQ-2021分离株与VR2332相比,NSP2氨基酸序列与美洲型NADC30具有相同不连续缺失(111+1+19);全基因重组分析结果表明,XJYQ-2021分离株是重组病毒,有一个重组片段,其中NADC30是亲本毒株,与JXA1之间发生重组获得。研究结果可为PRRSV的病毒分离提供优选细胞种类,同时掌握了新疆地区PRRSV流行毒株的遗传进化现状。