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勒哲多糖粗提物体外抑制H_(2)O_(2)诱导HepG2细胞氧化损伤的作用及机制研究

The effect of Lezhe polysaccharide crude extract on inhibiting H_(2)O_(2)-induced oxidative damage in HepG2 cells in vitro and its mechanism

作     者:樊慧芳 李国峰 陈海芳 张武岗 FAN Hui-fang;LI Guo-feng;CHEN Hai-fang;ZHANG Wu-gang

作者机构:江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330004 江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室南昌330004 

出 版 物:《中国新药杂志》 (Chinese Journal of New Drugs)

年 卷 期:2024年第33卷第8期

页      面:810-817页

核心收录:

学科分类:1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基  金:国家自然科学基金资助项目(81903917) 江西省教育厅资助项目(GJJ2200908) 江西省自然科学基金资助项目(20192-BAB205109) 博士科研启动基金资助项目(2018WBZR002)。 

主  题:勒哲多糖粗提物 抗氧化 核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1信号通路 细胞凋亡 

摘      要:目的:基于体外活性氧(reactive oxygen species,ROS)清除体系和H_(2)O_(2)诱导HepG2细胞氧化损伤模型探讨勒哲多糖粗提物(LZC)的体外抗氧化作用和机制。方法:测定LZC对羟基自由基、超氧阴离子、DPPH自由基、亚硝酸根离子的清除作用;试剂盒检测H_(2)O_(2)诱导HepG2细胞氧化损伤模型中细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)水平,2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(2’,7’-dichlorofluorescein diacetate,DCFH2-DA)荧光探针检测细胞内ROS水平和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,Western blot检测核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1(nuclear factor erythroid-2-related factor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)、肿瘤蛋白53(p53)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)的蛋白表达。结果:LZC表现出强ROS清除活性,显著提升H_(2)O_(2)诱导HepG2细胞氧化损伤模型中细胞的GSH-Px活性,抑制MDA水平、ROS释放和细胞凋亡。Western blot结果表明LZC能上调Nrf2和HO-1的蛋白表达,下调p53,Bax和Caspase-3表达。结论:LZC具有较强的体外抗氧化作用,其作用与激活Nrf2/HO-1信号通路进而抑制细胞凋亡有关。

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