清解扶正颗粒调控Cathepsin B/NLRP3通路减轻大肠癌小鼠5-FU化疗性肠黏膜炎的机制研究

作     者：袁颖绯 林久茂 林明和 赵锦燕 陈旭征 刘锦洪 朱晓勤 

作者机构：福建省中西医结合老年性疾病重点实验室 福建省高校中西医结合基础重点实验室 福建中医药大学中西医结合研究院 

出 版 物：《康复学报》 (Rehabilitation Medicine)

年 卷 期：2024年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金课题(81774121) 福建省自然科学基金项目(2021J01941、2021J01939) 福建省教育厅A类科技项目(JAT200230) 福建中医药大学校管课题(X2020015) 

主　　题：清解扶正颗粒 5-氟尿嘧啶 肠黏膜炎 Cathepsin B NLRP3 

摘      要：目的 基于Cathepsin B/NLRP3通路探讨清解扶正颗粒对大肠癌小鼠经5-氟尿嘧啶（5-FU）化疗后所致的肠黏膜炎的治疗作用及作用机制。方法 将24只雄性BALB/c小鼠采取右前肢腋部皮下接种CT26细胞的方法构建大肠癌皮下移植瘤小鼠模型，待瘤体生长至100-300 mm3时，按照瘤体体积将小鼠随机分为对照组（Control组）、5-FU组、5-FU+清解扶正颗粒组（5-FU+QFG组），每组8只。对照组给予生理盐水灌胃和腹腔注射，其他每组小鼠腹腔注射5-FU(50 mg/kg·d-1)每日1次，连续5 d;5-FU+QFG组在化疗的同时灌胃给予清解扶正颗粒（1.0 g/kg·d-1），每日1次，连续7 d。每天观察小鼠的腹泻情况，记录体质量及瘤体积等情况。第7 d末次给药后禁食12 h，动物取材，进行实验检测。HE染色观察小鼠空肠组织病理变化；ELISA法检测各组小鼠血清中二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸（D-LA）、内毒素（ET）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达；免疫组化检测空肠组织中组织蛋白酶B(Cathepsin B)的阳性表达；实时荧光定量PCR法检测空肠组织中紧密连接蛋白ZO-1、Occludin mRNA的表达，Western blot检测空肠组织中ZO-1、Occludin、Cathepsin B、NLRP3、ASC、cleaved Caspase-1蛋白的表达。结果 在实验周期内，清解扶正颗粒能够显著减轻5-FU化疗引起的腹泻症状（P0.05），对5-FU抑制瘤体生长没有显著的协同效应（P0.05）；清解扶正颗粒可显著改善5-FU化疗引起的肠黏膜绒毛变短、隐窝变深、炎性细胞浸润等肠黏膜损伤症状；与5-FU组比较，清解扶正颗粒可以显著降低大肠癌小鼠血清中DAO、D-LA、ET以及促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的含量（P0.05）；显著降低空肠组织中Cathepsin B蛋白的表达（P0.05），降低空肠组织中NLRP3、ASC、cleaved Caspase-1蛋白的表达（P0.05）；增加空肠组织中紧密连接蛋白ZO-1、Occludin mRNA和蛋白的表达（P0.05）。结论 清解扶正颗粒通过调控Cathepsin B/NLRP3通路，减少促炎细胞因子释放，抑制肠黏膜炎症反应，修复肠黏膜屏障损伤，从而减轻5-FU引起的化疗性肠黏膜炎。