清解扶正颗粒调控Cathepsin B/NLRP3通路减轻大肠癌小鼠5-FU化疗性肠黏膜炎的机制研究
作者机构:福建省中西医结合老年性疾病重点实验室 福建省高校中西医结合基础重点实验室 福建中医药大学中西医结合研究院
出 版 物:《康复学报》 (Rehabilitation Medicine)
年 卷 期:2024年
学科分类:1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金课题(81774121) 福建省自然科学基金项目(2021J01941、2021J01939) 福建省教育厅A类科技项目(JAT200230) 福建中医药大学校管课题(X2020015)
主 题:清解扶正颗粒 5-氟尿嘧啶 肠黏膜炎 Cathepsin B NLRP3
摘 要:目的 基于Cathepsin B/NLRP3通路探讨清解扶正颗粒对大肠癌小鼠经5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗后所致的肠黏膜炎的治疗作用及作用机制。方法 将24只雄性BALB/c小鼠采取右前肢腋部皮下接种CT26细胞的方法构建大肠癌皮下移植瘤小鼠模型,待瘤体生长至100-300 mm3时,按照瘤体体积将小鼠随机分为对照组(Control组)、5-FU组、5-FU+清解扶正颗粒组(5-FU+QFG组),每组8只。对照组给予生理盐水灌胃和腹腔注射,其他每组小鼠腹腔注射5-FU(50 mg/kg·d-1)每日1次,连续5 d;5-FU+QFG组在化疗的同时灌胃给予清解扶正颗粒(1.0 g/kg·d-1),每日1次,连续7 d。每天观察小鼠的腹泻情况,记录体质量及瘤体积等情况。第7 d末次给药后禁食12 h,动物取材,进行实验检测。HE染色观察小鼠空肠组织病理变化;ELISA法检测各组小鼠血清中二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)、内毒素(ET)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达;免疫组化检测空肠组织中组织蛋白酶B(Cathepsin B)的阳性表达;实时荧光定量PCR法检测空肠组织中紧密连接蛋白ZO-1、Occludin mRNA的表达,Western blot检测空肠组织中ZO-1、Occludin、Cathepsin B、NLRP3、ASC、cleaved Caspase-1蛋白的表达。结果 在实验周期内,清解扶正颗粒能够显著减轻5-FU化疗引起的腹泻症状(P0.05),对5-FU抑制瘤体生长没有显著的协同效应(P0.05);清解扶正颗粒可显著改善5-FU化疗引起的肠黏膜绒毛变短、隐窝变深、炎性细胞浸润等肠黏膜损伤症状;与5-FU组比较,清解扶正颗粒可以显著降低大肠癌小鼠血清中DAO、D-LA、ET以及促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的含量(P0.05);显著降低空肠组织中Cathepsin B蛋白的表达(P0.05),降低空肠组织中NLRP3、ASC、cleaved Caspase-1蛋白的表达(P0.05);增加空肠组织中紧密连接蛋白ZO-1、Occludin mRNA和蛋白的表达(P0.05)。结论 清解扶正颗粒通过调控Cathepsin B/NLRP3通路,减少促炎细胞因子释放,抑制肠黏膜炎症反应,修复肠黏膜屏障损伤,从而减轻5-FU引起的化疗性肠黏膜炎。