鳜弹状病毒N蛋白与鳜c-Myc互作调控谷氨酰胺代谢机制

作     者：张秋爽 叶彩媚 牛银杰 林强 梁红茹 罗霞 李宁求 付小哲 ZHANG Qiushuang;YE Caimei;NIU Yinjie;LIN Qiang;LIANG Hongru;LUO Xia;LI Ningqiu;FU Xiaozhe

作者机构：中国水产科学研究院珠江水产研究所农业农村部渔用药物创制重点实验室广东省水产动物免疫与绿色养殖重点实验室 上海海洋大学水产与生命学院 

出 版 物：《水产学报》 (Journal of Fisheries of China)

年 卷 期：2024年第48卷第5期

页      面：56-64页

核心收录：

学科分类：0906[农学-兽医学] 09[农学] 

基　　金：国家重点研发计划(2023YFD2400701) 广州市重点研发计划(2024B03J1263) 中国水产科学研究院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助(2023TD48)~~ 

主　　题：鳜 鳜弹状病毒(SCRV) 鳜c-Myc 蛋白互作 谷氨酰胺代谢 

摘      要：为了研究鳜弹状病毒(SCRV)如何调控鳜c-Myc (Sc-c-Myc)进而调控谷氨酰胺代谢的分子机制，本研究通过免疫共沉淀联合蛋白质谱寻找可能与Sc-c-Myc互作的病毒蛋白，初步分析确定为核衣壳蛋白(N蛋白)；Co-IP结果显示，SCRV的N蛋白与Sc-c-Myc存在相互作用。通过PCR扩增获得了带有Flag标签序列的SCRV-N基因的ORF片段，并构建了SCRV-N蛋白过表达载体pcDNA-N-Flag；将pcDNA-N-Flag质粒转染鳜脑组织细胞系(CPB细胞系)，荧光共定位结果显示，Sc-c-Myc与SCRV-N在细胞质内存在共定位现象；通过逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)和免疫印记(Western blot)检测转染pcDNA-N-Flag的CPB细胞系中Sc-c-Myc及谷氨酰胺代谢通路关键酶(GLS1、GDH和IDH2)的表达变化，发现Sc-c-Myc、GLS1的转录水平和蛋白水平均显著上调。综上表明，SCRV的N蛋白与Sc-c-Myc互作促进Sc-c-Myc的表达，进而调控宿主细胞谷氨酰胺代谢途径，为SCRV防控提供了新的靶点。