鱼类迟缓爱德华氏菌肠溶口服疫苗的制备及免疫保护效应研究

作     者：魏俊利 薛淑霞 孙妍 王雪惠 董学旺 孙金生 Wei Junli;Xue Shuxia;Sun Yan;Wang Xuehui;Dong Xuewang;Sun Jinsheng

作者机构：天津市动物疫病预防控制中心天津300402 天津师范大学生命科学学院天津300387 天津市水产研究所天津300221 

出 版 物：《天津农学院学报》 (Journal of Tianjin Agricultural University)

年 卷 期：2024年第31卷第2期

页      面：51-55页

学科分类：0906[农学-兽医学] 09[农学] 

基　　金：天津市科技支撑计划项目(14ZCZDNC00007) 天津市农业科技成果转化项目(201502070) 天津市水产研代农业技术体系创新团队项目(ITTFRS2017008) 

主　　题：迟缓爱德华氏菌 口服疫苗 肠溶微球 免疫保护效应 

摘      要：本文采用海藻酸钠作为载体,采用乳化复沉淀方法包裹迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)全菌制备疫苗微球。制备工艺研究结果表明:3%(m/v)海藻酸钠溶液,4%(m/v)CaCl_(2)溶液,水油相比1∶2,乳化剂Span801%,搅拌速度1200 r/min为最佳制备工艺,微球包埋率达91.04%,微球平均粒径(16.51±11.87)μm。通过人工胃肠液对疫苗微球的耐受性进行分析,微球在体外人工模拟胃液和肠液中16h释放率分别为0.8%和98.1%。用表达有绿色荧光蛋白的大肠杆菌做示踪标记,口灌免疫半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Gunther),疫苗能耐受胃的酸性环境影响,通过前消化道到达后肠。免疫保护效应研究表明,口腔灌注疫苗后,出现特异性和非特异性免疫应答,疫苗组在初免后第14天血清效价达到峰值1∶322;外周血白细胞吞噬率在初免后第14天达到峰值27.06%,吞噬指数在初免后第14天达到峰值1.65。初免后第28天用迟缓爱德华氏菌活菌攻毒,对照组死亡率58.82%,疫苗组死亡率13.33%,免疫保护率为77.33%。本研究优化了鱼类肠溶口服疫苗的制备工艺,疫苗免疫评价结果表明,该口服疫苗可以有效激活鱼体免疫反应,预防鱼类疾病发生。