射干麻黄汤及其辛、苦味药组拆方对寒哮大鼠气道炎症及肺组织TRPV1/TAS2R14表达的影响

作     者：袁亚美 叶卫东 程悦 李秋慧 刘家鑫 乔佳乐 王坤 方向明 

作者机构：安徽中医药大学 新安医学教育部重点实验室 安徽中医药大学第二附属医院 中医药防治肺系重大疾病应用转化安徽省重点实验室 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目（82074401） 国家自然科学基金青年项目（82305187） 安徽省教育厅自然科学研究重点项目(2022AH050446，2023AH050821) 安徽中医药大学自然科学研究重点项目（2021zrzd18） 

主　　题：辛味药 苦味药 寒哮 瞬时受体电位通道香草醛亚型1(TRPV1) 苦味受体14(TAS2R14) 

摘      要：目的：探讨射干麻黄汤辛、苦味药组对哮喘寒哮证大鼠肺组织中瞬时受体电位通道香草醛亚型1(TRPV1)、苦味受体14(TAS2R14)蛋白表达的影响。方法：70只SD大鼠随机分为7组，正常组、模型组、射干麻黄汤组、辛味药组、苦味药组、地塞米松组、桂龙咳喘宁组，10%卵清蛋白(OVA)结合氢氧化铝(AL(OH)3)腹腔及四肢皮下注射致敏，联合2% OVA雾化及寒冷(2～4 ℃)刺激，激发大鼠寒哮模型。射干麻黄汤、辛、苦味(6.43g·kg-1)、地塞米松(0.5 g·kg-1)、桂龙咳喘宁组(10 g·kg-1)灌胃及雾化，空白、模型组以等量生理盐水灌胃及雾化，持续干预3周。末次激发后，对大鼠肺组织进行苏木素-伊红(HE)、碘酸雪夫(PAS)染色、马松(Masson)染色观察气道炎症反应和细胞增殖情况。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素-5(IL-5)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量；免疫荧光法(IF)检测TRPV1、TAS2R14的表达；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肺组织TRPV1、TAS2R14、磷脂酶C，β2(PLCβ2)、细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达情况。结果：与空白组比较，模型组大鼠饮水、饮食及体质量下降，气道炎性细胞浸润，杯状细胞增生，组织纤维化及胶原蛋白沉积情况增多。升高了血清中IL-5、TNF-α、TSLP和TGF-β1含量(P0.01)，促进了TRPV1、PLCβ2、α-SMA的表达、抑制了TAS2R14、Bcl-2的表达(P0.01，P0.05)；与模型组比较，射干麻黄汤、辛味药及苦味药物组大鼠饮水、饮食及体重改善，减少气道炎性细胞浸润，杯状细胞增生，组织纤维化改变及胶原蛋白沉积；降低血清中IL-5、TNF-α、TSLP和TGF-β1含量(P0.01)，抑制TRPV1、PLCβ2、α-SMA的表达、激活了TAS2R14、Bcl-2的表达(P0.01，P0.05)。结论：射干麻黄汤及其辛、苦味药物组可以明显减轻OVA诱发的哮喘大鼠气道炎症，降低TRPV1、PLCβ2、α-SMA蛋白的表达，激活TAS2R14、Bcl-2蛋白的表达，其中苦味药组较辛味药组佳，辛苦相合其疗效增强，达到配伍之效。提示射干麻黄汤及其辛、苦味药物组能够减轻OVA诱发的哮喘气道炎症可能与抑制辛味相关TRPV1蛋白及激活苦味相关TAS2R14蛋白相关。