茂源链霉菌来源的谷氨酰胺转氨酶在***中的高效表达

作     者：袁方 李国莹 顾秋亚 余晓斌 

作者机构：江南大学生物工程学院 江苏一鸣生物股份有限公司 

出 版 物：《食品与发酵工业》 (Food and Fermentation Industries)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 083201[工学-食品科学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主　　题：谷氨酰胺转氨酶 茂源链霉菌 大肠杆菌 高效表达 

摘      要：谷氨酰胺转氨酶(transglutaminase， TGase)可以促进蛋白质分子内或分子间的交联，在食品、制药、纺织等行业中均有着广泛的应用。为了高效生产具有优良特性的TGase，该研究以茂源链霉菌(Streptomyces mobaraensis)来源的TGase为研究对象，比较了两个不同来源的TGase的性质，将具有较优酶学性质的TGase基因tgLD分别采用6种不同质粒在大肠杆菌(Escherichia coli)中进行异源表达。其中，重组菌E. coli BL21(DE3) (pET32a-tgLD)实现了成熟TGase的异源表达，添加0.2 mmol/L IPTG、25 ℃诱导8 h，重组TGLD的酶活力为0.45 U/mL。为了进一步提高TGLD的表达量，构建了可以特异性激活pro-TGase的2种表达载体。其中，重组菌E. coli BL21(DE3) (pCOLDⅡ-pro-EK-tgLD)，添加0.2 mmol/L IPTG、15 ℃诱导24 h，体外活化后获得具有活性的TGLD酶，其酶活力达25.23 U/mL。该研究实现了具有优良性质的活性TGLD在E. coli 中的高效表达。