LncRNA MALAT1/miR-876-5p/FOXM1轴对TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖、凋亡和炎症反应的影响

作     者：金曌 刘钟 彭静 胡荣毅 吴娟 黄琴斯 王飞 

作者机构：湖北中医药大学针灸骨伤学院 武汉市第一医院皮肤科 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：武汉市卫生健康委科研项目(编号WX21A13)资助 

主　　题：肺腺癌转移相关转录子1 miR-876-5p 叉头框蛋白质M1 细胞增殖 银屑病 

摘      要：目的:探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录子1(lncRNA MALAT1)/miR-876-5p/叉头框蛋白质M1(FOXM1)轴对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的HaCaT细胞增殖、凋亡和炎症反应的影响。方法:将HaCaT细胞分为Ct组、Model组、si-NC组、si- MALAT1组、mimicNC组、miR-876-5pmimic组、si- MALAT1+inhibitorNC组、si- MALAT1+miR-876-5pinhibitor组，除Ct组外，其它组细胞均需用25μg/LTNF-α处理以诱导银屑病体外细胞模型，TNF-α诱导24后再转染对应的转染物48h，用于后续实验。qRT-PCR检测细胞中MALAT1、miR-876-5p表达；CCK-8法、EdU染色检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β水平；westernblot检测FOXM1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达；双荧光素酶报告基因实验验证MALAT1与miR-876-5p、miR-876-5p与FOXM1的关系；RNApulldown实验验证MALAT1与miR-876-5p的关系。结果:与对照组比较，实验组组织中 MALAT1、FOXM1蛋白表达升高，miR-876-5p表达降低(P0.05)；与Ct组比较，Model组HaCaT细胞中MALAT1、FOXM1蛋白表达、OD450值、EdU阳性率、细胞上清液中IL-6、TNF-α、IL-1β水平、PCNA、Bcl-2蛋白表达升高，miR-876-5p表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低(P0.05)；沉默 MALAT1或过表达miR-876-5p可抑制TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖、炎症反应，促进细胞凋亡；miR-876-5p inhibitor减弱了沉默MALAT1对TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖及炎症反应的抑制作用，以及对细胞凋亡的促进；MALAT1靶向调控miR-876-5p /FOXM1轴。结论:沉默MALAT1可能通过上调miR-876-5p 来抑制FOXM1表达，进而抑制TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖、炎症反应，促进细胞凋亡。