三重荧光PCR技术在食品产气荚膜梭菌毒素基因检测中的应用
Application of Triple Fluorescent PCR Technique in the Detection of Food Toxin Genes of Clostridium perfringens作者机构:长沙医学院湖南长沙410219
出 版 物:《食品安全导刊》 (China Food Safety Magazine)
年 卷 期:2024年第2期
页 面:91-93页
学科分类:1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100403[医学-营养与食品卫生学] 10[医学]
摘 要:目的:建立食品中产气荚膜梭菌常见3种毒素(α、β、ε)的基因cpa、cpb、ext的三重荧光PCR检测方法。方法:设计产气荚膜梭菌的α、β、ε 3种毒素基因的引物和探针,优化退火温度,建立三重荧光PCR方法,探讨其特异性、灵敏度。结果:该方法的特异性较强,仅能检测出产气荚膜梭菌,对其他梭菌与常见食源性致病菌的扩增结果均为阴性;三重荧光PCR体系的检测灵敏度达到0.000 1 ng·μL^(-1)。用建立的方法对实验室样品进行鉴定,发现2份食品样品中有产气荚膜梭菌(均为A型)。结论:本研究建立的三重荧光PCR方法的特异性、灵敏度均较高,且操作简单、检测速度快,适用于食品中产气荚膜梭菌的检测。