槐杞黄颗粒对糖尿病肾病大鼠及高糖环境下肾细胞的保护机制
The Protection Mechanism of Huaiqihuang Granules from Diabetic Kidney Disease in Rats and for Renal Cells in High-Glucose Environment作者机构:武汉市中西医结合医院湖北武汉430030
出 版 物:《广州中医药大学学报》 (Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine)
年 卷 期:2024年第41卷第5期
页 面:1290-1297页
学科分类:1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学]
主 题:槐杞黄颗粒 糖尿病肾病 活性氧簇(ROS) NLRP3炎症小体 大鼠 肾小管上皮细胞(HK2)
摘 要:【目的】观察槐杞黄颗粒对糖尿病肾病(DKD)大鼠及高糖环境下肾细胞的保护机制。【方法】(1)体内实验:采用高脂肪饲料喂养结合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法构建DKD大鼠模型。实验设正常组,模型组,槐杞黄颗粒低、中、高剂量组及氯沙坦组,每组10只大鼠。给予对应处理后,测定尿微量白蛋白、空腹血糖、血清肌酐、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇等主要生化指标,分别采用苏木素-伊红(HE)染色、高碘酸希夫(PAS)染色和马松(Masson)染色观察肾组织病理改变。(2)体外实验:构建高糖诱导肾小管上皮细胞HK2模型。实验分为正常糖组、高糖组和槐杞黄颗粒组及甘露醇组。给予对应处理后,MTT法检测细胞增殖情况,采用2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法和MitoSOX/Hoechst 33342染色法分别检测细胞内、线粒体活性氧簇(ROS)的生成,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测炎症小体相关蛋白NOD样受体蛋白3(NLRP3)、裂解型半胱天冬酶3(cleaved-Caspase-3)和白细胞介素1β(IL-1β)及肾纤维化相关蛋白纤维连接蛋白(FN)和Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)的表达。【结果】(1)在体内实验中,槐杞黄颗粒可显著改善DKD大鼠尿微量白蛋白排泄、血清肌酐异常,高血糖和脂质代谢紊乱,减轻肾脏组织病理损害;(2)在体外实验中,槐杞黄颗粒可显著抑制高糖诱导HK2细胞增殖和ROS的过量产生,降低高糖诱导HK2细胞NLRP3炎症小体的激活和肾纤维化相关蛋白FN和ColⅣ的表达。【结论】槐杞黄颗粒可有效改善DKD大鼠,其对高糖环境下肾细胞的保护机制可能与抑制ROS生成、NLRP3炎症小体活化及纤维化蛋白高表达有关。