基于网络药理学与实验验证探讨真武汤治疗慢性心衰的作用机制

作     者：王卓溪 周亚滨 客蕊 WANG Zhuoxi;ZHOU Yabin;QIE Rui

作者机构：黑龙江中医药大学第一临床医学院哈尔滨150040 黑龙江中医药大学附属第一医院哈尔滨150040 

出 版 物：《世界科学技术-中医药现代化》 (Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica-World Science and Technology)

年 卷 期：2024年第26卷第2期

页      面：543-556页

学科分类：10[医学] 

基　　金：黑龙江省中医药科研项目(ZHY2020-124):中药自拟方治疗非小细胞肺癌术后脾胃虚弱症患者生存期的随机对照临床试验 负责人:客蕊 

主　　题：真武汤 网络药理学 分子对接 慢性心衰 炎症 细胞凋亡 

摘      要：目的基于网络药理学与分子对接探讨真武汤治疗慢性心力衰竭(Chronic heart failure,CHF)的作用机制并进行实验验证。方法通过TCMSP数据库检索真武汤的活性成分与作用靶点;通过OMIM、TTD与Gene Cards数据库检索CHF相关基因;构建“复方-疾病-活性成分-靶点网络图。利用Cytoscape3.6.0软件与STRING数据库构建真武汤与CHF共同靶点的蛋白互作网络。利用Bioconductor对靶点蛋白进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。运用Auto Dock Tools 1.5.6软件对主要成分与作用靶点进行分子对接。建造CHF大鼠模型,通过ELISA、Western blot、RT-q PCR对主要分子对接结果进行实验验证。结果获得真武汤活性成分55种,主要包括β-谷甾醇、(+)-儿茶素、豆甾醇、蛇床子素、3β-乙酰氧基苍术碱,对应靶点84个,其中与CHF共同作用靶点17个,主要为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(CASP3)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)。GO与KEGG功能富集分析主要涉及内皮细胞增殖、脂代谢调控、IL-17与TNF等经典炎症相关信号通路。分子对接显示主要化合物与关键靶点均有良好的结合能力。实验结果表明,真武汤可以显著改善CHF动物模型的LVEF、LVFS、LVEDD、SV心功能指标,降低血清IL-6、TNF-α水平,提高心肌组织AKT1、PPARG m RNA与蛋白表达水平,降低CASP3 m RNA与蛋白表达水平。结论AKT1、IL-6、TNF、CASP3、PPARG等可能作为真武汤治疗CHF的关键靶点,通过豆甾醇、蛇床子素、(+)-儿茶素等活性成分介导抗炎、氧化应激、细胞凋亡等信号通路发挥多靶点、多途径的协同治疗作用。