Leber先天性黑矇10型一家系CEP290基因变异及临床表型分析

作     者：张海涛 朱子芊 但汉东 徐英英 郭含超 石路 毛良伟 Zhang Haitao;Zhu Ziqian;Dan Handong;Xu Yingying;Guo Hanchao;Shi Lu;Mao Liangwei

作者机构：河南省人民医院河南省立眼科医院河南省眼科研究所郑州大学人民医院郑州450003 郑州大学第三附属医院眼科郑州450052 武汉良培医学检验实验室武汉430075 华中农业大学农业生物信息湖北省重点实验室武汉430070 

出 版 物：《中华眼底病杂志》 (Chinese Journal of Ocular Fundus Diseases)

年 卷 期：2024年第40卷第4期

页      面：273-280页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

基　　金：河南省科技发展计划(182102311209) 河南省医学科技攻关计划联合共建项目(LHGJ20220088) 

主　　题：Leber先天性黑矇10型 CEP290基因 全外显子组测序 Minigene剪接验证 

摘      要：目的确定并观察1个汉族Leber先天性黑矇(LCA)家系的致病基因变异和临床表型。方法回顾性研究。2022年5月在河南省立眼科医院就诊的LCA10型一家系(1例患者和2名家系成员)纳入研究。详细询问患者病史、家族史并行眼底彩色照相、闪光视网膜电图(F-ERG)检查。采集先证者及其父母的外周静脉血3 ml,提取全基因组DNA。全外显子组测序(WES)、线粒体环基因组(mtDNA)测序以获得致病基因及变异。通过生物信息学分析方法对所有变异位点进行注释,并参考美国医学遗传学和基因组学学会(ACMG)对所有变异位点进行致病等级评估。对候选位点进行Sanger验证,并对致病性证据不足的错义变异行Minigene体外功能验证。结果先证者,男,7个月。视物追随反应差,指压眼征、畏光、眼球震颤,黄斑中心凹周围区视网膜色素上皮部分脱失。2岁时,F-ERG检查发现,双眼a、b波振幅重度降低,峰时延长,甚至无波形。先证者父母临床表型未见明显异常。WES结果显示,先证者CEP290基因第40、2号外显子分别存在c.5515_5518del(***1839Lysfs*11)(V1)移码变异和c.74CT(***25Val)(V2)错义变异。mtDNA测序结果为阴性。Sanger验证结果表明,先证者父亲、母亲分别携带杂合移码变异V1、新发错义变异V2,构成复合杂合变异。Minigene体外功能验证结果表明,V2变异使2号外显子产生一个新的剪接供体位点,从而导致2号外显子右侧缺失30个碱基对,蛋白质框内缺失10个氨基酸残基。ACMG评级分别为致病(V1)、可能致病变异(V2)。结论CEP290基因c.5515_5518del和新发变异c.74CT构成复合杂合变异可能是本家系的致病原因,分别导致截短蛋白的产生和前体信使RNA的异常剪接。LCA具有发病年龄小、视功能严重损害和致病变异多样性等特点。