睾丸酮丛毛单胞菌激素降解关键酶3,17β-HSD蛋白质相互作用研究

作     者：于璇 史翔予 赵艳阳 高乐 张昊 YU Xuan;SHI Xiangyu;ZHAO Yanyang;GAO Le;ZHANG Hao

作者机构：长春理工大学生命科学技术学院长春130022 

出 版 物：《长春理工大学学报（自然科学版）》 (Journal of Changchun University of Science and Technology(Natural Science Edition))

年 卷 期：2024年第47卷第2期

页      面：84-91页

学科分类：08[工学] 0836[工学-生物工程] 

基　　金：吉林省科技发展计划项目(20220402038GH 20210101025JC)。 

主　　题：睾丸酮丛毛单胞菌 甾体类激素降解 3,17β-HSD 免疫共沉淀 蛋白质相互作用 

摘      要：为研究睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas Testosteroni,C.T.)ATCC11996降解甾体类激素过程中关键蛋白质的相互作用关系,本文利用基因同源重组及移码突变原理构建睾丸酮降解关键酶3,17β-HSD基因敲除突变株,在回收率95%条件下高效液相检测野生株与突变株睾丸酮降解率,突变株对睾丸酮降解能力明显低于野生株;原核表达3,17β-HSD获得浓度2.4 mg/mL纯化蛋白,制备特异性鼠源多克隆抗体,ELISA检测抗体效价1∶320000;将多克隆抗体与经睾丸酮诱导的野生型C.T.细胞裂解液蛋白质复合物进行免疫共沉淀,质谱测定蛋白质相互作用组,结果表明短链脱氢酶SDRy(WP_003078287.1)为睾丸酮降解过程中关键酶3,17β-HSD的主要相互作用蛋白。