假禾谷镰刀菌RPA-CRISPR/Cas12a快速检测体系的建立与应用

作     者：卫艳珂 王强 徐向明 胡小平 商文静 

作者机构：西北农林科技大学植物保护学院植保资源与病虫害治理教育部重点实验室农业农村部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室 英国国家农业植物研究院东茂林研究所病虫害生态学研究组 

出 版 物：《菌物学报》 (Mycosystema)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 

基　　金：国家重点研发计划项目(2022YFD1400101-1) 科技部国际合作项目(G2023172013L) 科技部对发展中国家科技援助项目(KY202002018) 国家现代农业产业技术体系专项(CARS-03-37) 农业农村部专项(152307101) 

主　　题：快速检测 重组酶聚合酶等温扩增 CRISPR/Cas12a检测体系 假禾谷镰刀菌 

摘      要：假禾谷镰刀菌Fusarium pseudograminearum是引起我国黄淮麦区小麦茎基腐病的优势病原菌，对其精准、快速的检测有助于小麦茎基腐病的监测预警和精准防控。本研究基于F. pseudograminearum的NPS15基因，建立了重组酶聚合酶等温扩增技术(RPA)结合CRISPR/Cas12a的快速检测体系，该体系在37 ℃恒温条件下，40 min内可完成对目标病原菌的检测，检测灵敏度可达10-3pg/μL，检测结果可通过核酸试纸条颜色反应直观读取，具有特异、灵敏、快速等优点。经验证，该体系可从带菌土壤、种子以及发病植株等复杂样本中检测到目标病原菌，为在田间实时快速检测F. pseudograminearum提供了一种高效方法。