去铁胺通过抑制线粒体功能加重替莫唑胺诱导的胶质瘤细胞DNA损伤

作     者：吴若琳 韩瑞丽 米洋澜 谷雨 叶菁 袁媛 WU Ruolin;HAN Ruili;MI Yanglan;GU Yu;YE Jing;YUAN Yuan

作者机构：空军军医大学基础医学院病理学教研室陕西西安710032 延安大学基础医学院病理学教研室陕西延安716000 

出 版 物：《空军军医大学学报》 (Journal of Air Force Medical University)

年 卷 期：2024年第45卷第4期

页      面：396-400,406页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(82173120) 陕西省自然科学基础研究计划面上项目(2022JM-536) 

主　　题：去铁胺 替莫唑胺 胶质瘤 DNA损伤 铁硫簇 

摘      要：目的探讨去铁胺(DFO)加重替莫唑胺(TMZ)诱导胶质瘤细胞DNA损伤的作用及机制。方法将U251胶质瘤细胞分为对照组、TMZ组(100μmol/L)、DFO组(500μmol/L)及两药联合处理组(100μmol/L TMZ+500μmol/L DFO)。处理24 h后,利用免疫荧光技术检测磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)焦点的形成情况;菲咯嗪比色法和化学发光法分别检测细胞内总铁含量和线粒体铁含量;荧光法检测线粒体膜电位,ATP试剂盒和乳酸试剂盒分别测定细胞内ATP含量和乳酸含量;qRT-PCR分析铁硫簇(ISC)合成相关分子mRNA的表达,Western blotting分析DNA损伤修复相关蛋白质的表达情况。结果DFO和TMZ会导致胶质瘤细胞产生不同程度的DNA损伤(P0.05),且DFO可以加重TMZ诱导的胶质瘤细胞DNA损伤(P0.01)。DFO联合TMZ显著减少细胞总铁和线粒体铁含量(P0.05),降低线粒体膜电位及ATP含量(P0.01),同时增加乳酸生成(P0.01);DFO阻碍ISC合成,抑制DNA损伤修复,加重TMZ诱导的DNA损伤(P0.05)。结论DFO通过影响铁代谢导致线粒体功能障碍,减少ISC的合成,从而抑制DNA损伤修复,加重TMZ诱导的胶质瘤细胞DNA损伤。