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一锅法全细胞催化合成胞苷三磷酸的研究

One⁃pot whole⁃cell catalytic synthesis of cytidine triphosphate

作     者:沈来伟 任宇红 SHEN Lai-wei;REN Yu-hong

作者机构:华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室上海200237 

出 版 物:《现代化工》 (Modern Chemical Industry)

年 卷 期:2024年第44卷第4期

页      面:169-174页

学科分类:08[工学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主  题:胞苷三磷酸 全细胞催化 一锅法合成 共表达 融合表达 

摘      要:分别在大肠杆菌BL21(DE3)中构建胞苷激酶(CDK)与乙酸激酶(ACK)的共表达及融合表达体系和胞苷酸激酶(CMK)与乙酸激酶(ACK)的融合表达体系,其中融合菌株SUMO-CDK-L2-ACK与CMK-L2-ACK构成的双融合催化体系具有较好的催化活性。搭建了双融合菌全细胞一锅法催化合成胞苷三磷酸(CTP)反应体系,并对其温度、pH、金属离子、乙酰磷酸投加量及菌粉投加量等进行优化。结果表明,在优化反应体系中,反应75 min时CTP产量达到最高为108 mmol/L,总收率达86.4%,实现了CTP的一锅法高效合成。

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